A diagnosztikai módszer (ELISA) informatív és nem túl drága, ezért sok laboratórium kínálja ezt a módszert ügyfelei számára ( enzim immunoassay vér). A vizsgálatot éhgyomorra végzik, az elemzéshez vért vesznek a páciens ulnaris vénájából. Az ELISA előtt tanácsos nem dohányozni és alkoholt fogyasztani.
A szervezet ellenálló képességének felmérésére szolgáló vérvizsgálati módszerek közül fertőző betegségekés a betegség fázisának bemutatásában fontos helyet foglal el az enzim-linked immunosorbent assay (ELISA). A tanulmány elvégzése lehetővé teszi a tevékenységek átfogó értékelését védő funkció vért és azonosítani az immunhiány állapotát fertőző patológiákban, valamint vérbetegségekben, autoimmun folyamatokban, hormonális problémák.
Ez laboratóriumi vizsgálat, amely lehetővé teszi bizonyos antigének (kórokozók) elleni specifikus antitestek (fehérje jellegű védő vérfaktorok) jelenlétének meghatározását. Az antitestek közül elsődleges fontosságúak az immunglobulinok, amelyek immunkomplexek formájában is létezhetnek.
Az immunglobulinok az emberi immunrendszer komplex neurohumorális reakciói eredményeként keletkeznek, amelyek az idegen antigének bejuttatására adott válaszként jönnek létre. A kórokozó minden típusa saját specifikus antitesteket termel. Egy antigén vagy kóros mikroorganizmus „megkötésével” hatnak, komplex „antigén-antitest” vegyületet képeznek, majd ezt követik a semlegesítés, az enzimatikus lízis, a fagocitózis reakciói és a szervezetből való eltávolítás a betegben jelenlévő kórokozó vagy káros anyag típusa.
Érdemes észben tartani, hogy a kúra után az antitestek nagyon sokáig a szervezetünkben maradhatnak, még azután is, hogy a fertőzés elhagyta szervezetünket, i. úgynevezett „szerológiai heg” marad. Vegyünk egy példát: több ezer csillag van az éjszakai égbolton. Sok ilyen csillag már régen meghalt, de fényük még mindig elér bennünket, évszázadok óta. Lényegében csak a csillag nyomát látjuk. Fény van, de a csillag már rég eltűnt.
De ha nincs fény, ez nem jelenti azt, hogy a csillag nem volt ott. Ugyanez a helyzet az antitestekkel. Jelenlétük nem garantálja a kívánt anyag jelenlétét a szervezetben. fertőző ágens. Az antitestek hiánya nem jelenti azt, hogy nincs fertőzés. Ha az ELISA teszt eredménye pozitív, ez azt jelenti, hogy a fertőzést specifikusabb és költségesebb módszerekkel kell keresnie - PCR, bakteriológiai tenyészetek. Lehetséges hamis pozitív eredmény ha több mikrobának van hasonló antigénszerkezete, akkor a különböző mikrobákkal szemben „hasonló” antitestek képződnek.
Az immunglobulinok 5 fő osztályát fedezték fel és tanulmányozták – IgA, IgM, IgG, IgD, IgE. a többiek szerepe még nem teljesen tisztázott, tudományos kutatás alatt áll.
Az immunglobulin A (IgA) fő feladata a nyálkahártyák védő funkciói légutak, gyomor-bél traktusés a húgyúti rendszer. A betegség akut kezdetén lehetetlen azonosítani őket. Ezek a védőkomplexek csak a betegség kezdetének 2. hetétől jelennek meg, néha később. Az immunglobulin A nagy része a nyálkahártyákban koncentrálódik. Körülbelül 80%. A fennmaradó antitestek a vérben keringenek.
A fő funkció a mikroorganizmusok semlegesítése és elpusztítása. Miután a betegség akut megnyilvánulásai enyhülnek, ezen immunglobulinok mennyisége csökkenni kezd, és a betegség kezdete után 8 hétig teljesen eltűnik. Ha többben is kimutatható az IgA késői időpontok, akkor ez krónikus folyamatot jelez.
Az akut fázis fő és első markerei patológia kialakulása az M osztályú immunglobulinok (IgM). A betegség kezdetétől számított 5. napon észlelik őket. Jelenlétük a vérben körülbelül 6 héten belül meghatározható. Aztán gyorsan kezdenek eltűnni.
A reziduális immunválaszt az immunglobulin G (IgG) vérben való jelenléte jellemzi. Ezeknek a tényezőknek a megjelenése a vérben körülbelül egy hónappal a betegség kezdete után észlelhető. A jövőben hosszú hónapokra, évekre, sőt akár egy életre is meghatározhatók, védő funkciót töltenek be a betegség visszatérése (relapszusa) ellen, és esetenként ellehetetlenítik. másodlagos fejlődés patológia.
Ha a G immunglobulin mennyisége ismét növekedni kezd, akkor újbóli fertőzésre lehet gyanakodni. Hasonló következtetést vonhatunk le, ha két vagy három mintát veszünk 2 hetes időközönként.
Az enzim immunoassay-hez a legtöbb esetben a páciens vérét használják, néha szöveteket gyűjtenek üvegszerű, gerinccsatorna folyadék, magzatvíz.
A vért injekciós tűn keresztül fecskendőbe szívják a cubitalis vénából. A vizsgálatot üres gyomorban végzik. Nem szabad elfelejteni, hogy figyelembe néhány orvosi kellékek befolyásolhatja az elemzés eredményét. Véradás előtt tartózkodnia kell a dohányzástól és az alkoholfogyasztástól. A kábítószer-használat torzíthatja az eredményeket.
Az IgM, IgG, IgA immunglobulinok negatív értékei esetén a betegség hiányáról vagy annak kezdeti szakaszáról negatív eredmény is lehetséges, ha jelentős idő után teljes felépül.
Ha az IgA és IgM nem mutatható ki, és az IgG pozitív, akkor nagy valószínűséggel fertőző betegség vagy védőoltás után kialakult immunitásról beszélünk.
Ha az IgA és IgM nem mutatható ki, és az IgG pozitív, akkor nagy valószínűséggel fertőző betegség vagy védőoltás után kialakult immunitásról beszélünk
Amennyiben magas titer Az IgM negatív IgG, IgA értékeivel arra a következtetésre juthatunk, hogy akut fertőző betegségről van szó.
Egyidejű pozitív értékeket immunglobulin eredmények - az IgA, IgM, IgG egy meglévő relapszus akut fázisára jellemző krónikus betegség.
Amit a bemutatott technológia nyújt: a helminták jelenlétének meghatározása a vérben; egyéb kórokozók keresése a szervezetben; megtudhatja egészségi állapota romlásának okait; a kezelés is az így kapott teszteken alapul; nyomon követheti a saját állapotát immunrendszer.
Egy másik jó tulajdonság a rákmarkerek nyomon követése, függetlenül azok eredetétől, de természetesen feltéve, hogy jelen vannak a szervezetben. Ez a teszt alkalmas az emberi reproduktív rendszer állapotának leírására is. Bizonyos fehérjék, hormonok és peptidek jelenléte lehetővé teszi a partner lehetőségeinek megítélését a gyermekvállalás szempontjából, valamint a leendő magzat várható minőségét.
A Giardia vérvizsgálata meglehetősen népszerű gyakorlat a modern orvosok körében. Ezen túlmenően ez a kutatási módszer kiváló eszköz az orvosbiológiai elemzésekhez és a specifikus antigének tekintetében kvantitatív statisztikákhoz.
Igaz, ez több összetett esetek ezért az ilyen elemzés minősége nagymértékben függ a vizsgálatot végző laboratóriumi személyzettől. A technológia jellemzői és különbsége a régi laboratóriumi vizsgálatoktól:
Kevesen tudják, milyen vérvizsgálatok léteznek az emberi immunrendszer szempontjából, mivel ezek a vizsgálatok nem olyan gyakoriak. Általában egy ilyen vérvizsgálat információt nyújt az emberi szervezetben lévő immunhiányos vírusról, és névtelen, mivel a beteg kérésére végzik el.
A mintavételhez éhgyomorra vénából vett vért használnak, amelyből centrifugálással szérumot nyernek a vizsgálathoz. Ezenkívül a vérszérum vizsgálata számos nemi betegségek(szifilisz, herpesz, chlamydia), valamint minden típusú hepatitis, kanyaró, rubeola, mumpsz és toxoplazmózis.
Az ELISA analízishez alapvetően a vizsgált biológiai anyag a vér, de az is vizsgálható cerebrospinális folyadék, az üvegtest tartalma, magzatvíz stb.
Az immunglobulinok olyan immunmolekulák, amelyek képesek kötődni a legtöbb fertőző kórokozóhoz és méreganyaghoz, illetve semlegesíteni a szervezetben. Ebben az esetben az immunglobulinok legfontosabb jellemzője a specifitásuk, vagyis a specifikus antigénhez való kötődési képesség. Ezt a tulajdonságot használják az immunglobulin vérvizsgálatának elvégzésére.
Ötféle immunglobulin létezik, de a legtöbbet az A, M és G immunglobulinok tanulmányozzák. Az M és G immunglobulinok a vérben mutatják aktivitásukat. Az immunglobulinok A egyfajta gátat képeznek a nyálkahártyák felszínén, mivel ott nagy mennyiségben vannak jelen.
Az immunológiai vérvizsgálat lehetővé teszi az immunglobulinok típusának meghatározását, amelynek köszönhetően az ELISA nemcsak a betegség diagnosztizálását, hanem a betegség stádiumának meghatározását és a betegség dinamikájának nyomon követését is lehetővé teszi:
A szerológiai vérvizsgálat a fertőző betegségek diagnosztizálására és a fertőző folyamat stádiumának meghatározására szolgáló laboratóriumi vérvizsgálati módszer. A szerológiai reakció az antitestek és antigének kölcsönhatásán alapul.
Az antigének meghatározása a mikroorganizmusok nemzetségének és fajának meghatározására szolgál. Ez a módszer A kutatást az urológiában és a venereológiában használják. A szerológiai vérvizsgálathoz szükséges vért reggel éhgyomorra veszik vénából.
Az ELISA fő bioanyaga a vérszérum: a laboratóriumban a páciensből vérmintát vesznek egy vénából, amelyből utólag eltávolítják az elemzést megnehezítő képződött elemeket. Egyes esetekben az elemzéshez agy-gerincvelői folyadékot, magzatvizet, nyálkahártya-kenetet stb.
Az eredmények torzulásának elkerülése érdekében ajánlott éhgyomorra vért adni, és két héttel a vizsgálat előtt (ha a cél a krónikus, lappangó fertőző betegségek diagnosztizálása) abba kell hagyni az antibiotikumok és vírusellenes gyógyszerek szedését fedezni teljes lista ELISA indikációi.
Az ELISA tagadhatatlan előnye a módszer nagy érzékenysége és specificitása. Az érzékenység az a képesség, hogy felismerjük a kívánt anyagot, még akkor is, ha annak koncentrációja a mintában alacsony. A specifitás hibamentes diagnózist jelent: ha az eredmény pozitív, az azt jelenti, hogy pontosan azt az antitestet vagy antigént találták meg, amelyet vártunk, és nem másokat.
Az ELISA nagymértékben felváltotta a mikrobiológia „arany standardját” - egy bakteriológiai diagnosztikai módszert, amelynek során a kórokozó azonosításához el kellett izolálni a szervezetből, majd a tenyészetet tápközegen kémcsőben több napig termeszteni kellett.
Az elemzés teljes ideje alatt az orvosok kénytelenek voltak „vakon” kezelni a beteget, a betegség tüneteiből kitalálva a mikroorganizmus eredetét. Az IgM ELISA segítségével történő meghatározása lehetővé teszi a diagnózist pontos diagnózis már a betegség első napjaiban.
Az enzim immunoassay technológiai hatékonyságának magas foka minimalizálja az emberi tényező befolyását, ami csökkenti a hiba valószínűségét. Leggyakrabban használt modern laboratóriumok Az ELISA tesztrendszerek és reagensek ipari körülmények között készülnek, ami garantálja a pontos eredményeket.
Sajnos az ELISA elvégzéséhez tudnia kell, hogy pontosan mit kell keresni: az elemzési technika azt jelenti, hogy az orvosnak előzetesen feltételezése van a betegség természetéről. Ezért nincs értelme ilyen tesztet felírni abban a reményben, hogy véletlenül „kitalálják” a diagnózist.
Fertőző betegségek diagnosztizálása esetén az enzim immunoassay nem tudja megtalálni a kórokozót és meghatározni annak specifikus tulajdonságait: csak azt jelzi, hogy a beteg vérében vannak antitestek, amelyek közvetve idegen mikroorganizmus jelenlétét jelzik az emberi szervezetben. Az ELISA rendkívül pontos, de nem olcsó módszer, ezért okosan kell használni, és az eredményeket szakképzett orvosnak kell értelmeznie.
Az analízis tartalmától függően az adatlap táblázat formájában is megjelenítheti az összes antitestet vagy antigént negatív vagy pozitív reakcióra vonatkozó megjegyzésekkel, vagy jelezheti mennyiségi érték eredmény (negatív, gyengén pozitív, pozitív vagy erősen pozitív).
Az utóbbi lehetőség határozza meg, hogy hány antitestet tartalmaz az elemzett minta. Egy másik mennyiségi mutató az antitest aviditási indexe, százalékban kifejezve. Azt jelzi, hogy mennyi idő telt el a fertőző folyamat kezdete óta (minél magasabb az index, annál több).
Ma már több ezer típusú ELISA tesztrendszert gyártanak, amelyek legfeljebb specifikus antitestek és antigének kimutatását teszik lehetővé. különféle patológiák. Ezért ezt az elemzést szinte minden orvosi iparágban használják. Az ELISA-val felállított diagnózis a kinevezés garanciája megfelelő terápiaés a betegség hatékony kezelése.
Ha rendelkezik a szükséges reagensekkel és jól szervezett a laboratórium, a vérvételt követő 1-2 napon belül megkapja a vizsgálat eredményét. Egyes esetekben, ha szükség van vészhelyzetre, ez az időtartam 2-3 órára csökkenthető.
- modern laboratóriumi vizsgálat, amely specifikus antitesteket vagy antigéneket keres a vérben specifikus betegségek nemcsak az etiológiát, hanem a betegség stádiumát is azonosítani kell. Az ELISA eredmények minőségileg és mennyiségileg is megadhatók.
Jelenleg az ELISA-t a következő helyzetekben használják:
1) specifikus antitestek keresése bármely fertőző betegség ellen;
2) bármilyen betegség (fertőző, venereológiai) antigénjeinek felkutatása;
3) a beteg hormonális állapotának vizsgálata;
4) tumormarkerek vizsgálata;
5) autoimmun betegségek jelenlétének vizsgálata.
1) Az ELISA módszer magas specificitása és érzékenysége (több mint 90%).
2) A betegség meghatározásának és a folyamat dinamikájának nyomon követésének képessége, vagyis az antitestek számának összehasonlítása különböző időszakokban.
3) ELISA diagnosztika elérhetősége bármely egészségügyi intézményben.
1) Az immunválasz (antitestek) kimutatása, de magát a kórokozót nem.
Mielőtt tisztáznánk az ELISA módszer lényegét, ismerjünk meg röviden néhány fogalmat.
Antitestek (vagy immunglobulinok - Ig)
- B által termelt specifikus fehérjék
limfociták (immunsejtek) a szervezetbe kerülő fertőző kórokozók (vírusok, baktériumok, gombák stb.) hatására. Vannak immunglobulinok A (IgA), immunglobulinok E (IgE), immunglobulinok M (IgM), immunglobulinok G (IgG), immunglobulinok D (IgD). Eltérnek egymástól molekula alakjukban és tömegükben, felezési idejükben, a fertőző folyamatokban való részvételben/nem részvételben, valamint a fertőzés pillanatától kezdődően a kimutatás időpontjában. Ha figyelembe vesszük a molekulatömeget, akkor az IgM a legnagyobb súlyú - ez egy pentamer (950 000 dalton), ellentétben más Ig-ekkel (150-200 000 Da), ami miatt az IgM egyszerűen nem tud átjutni a placenta gáton. Ezért az IgM kimutatása egy 1 éves gyermeknél mindig a magzati fertőzés jelenlétének jele. A vérszérumban az immunglobulinok nagy részét az IgG (75-85%) képviseli, a legalacsonyabb az IgE (0,003%). Csak az IgA, M, G vesz részt közvetlenül a fertőzési folyamatban, az IgE az allergiás reakciók és betegségek jele, az IgD pedig csak a nyirokcsomók és a mandulák szövetében található meg, és a helyi immunitás kialakulásában játszik szerepet.
Antigének – szerves eredetű nagy molekulatömegű anyagok, különös tekintettel a fertőző és egyéb betegségek kórokozóira, valamint egy adott betegség (autoimmun betegségek, onkológia) során képződött különféle megváltozott sejtek anyagai.
Immun komplex – az immunfolyamatban részt vevő antigén-antitest komplex.
Az ELISA-nak több típusa is létezik (direkt, indirekt, blokkoló módszer, kompetitív), de a gyakorlatban leggyakrabban a heterogén szilárd fázisú immunoassay-t vagy ELISA-t (enzyme linked immunosorbent assay) alkalmazzák.
Az enzim immunoassay alapja az antigén és az antitest immunreakciója immunkomplex: antigén-antitest képződésével, amely az antitestek felületén lévő specifikus jelek enzimaktivitásának megváltozását eredményezi.
Egyszerűen fogalmazva, ez a folyamat több szakaszra osztható:
1) A vizsgálatot végző orvos tablettájának üregeinek felületén egy bizonyos kórokozó tisztított antigénje található. Amikor a pácienstől származó biológiai anyagot (vérszérumot) adják hozzá, specifikus reakció lép fel ezen antigén és a kívánt antitest (immunglobulin) között. Ez a vegyület a következő lépésben „speciális antigénként” fog működni.
2) Ebben a szakaszban az IC (immunkomplexek) képződése következik be - egy reakció egy „speciális antigén” és egy konjugátum között (ez egy peroxidáz enzimmel jelölt immunglobulin). Speciális kromogént adnak hozzá. Ennek az enzimreakciónak az eredménye egy színes anyag képződése a tabletta üregében, amelynek színintenzitása a páciens anyagában lévő immunglobulinok (antitestek) mennyiségétől függ.
3) Ezt követően az eredmény értékelése: fotometria többcsatornás spektrofotométerrel, a vizsgált anyag optikai sűrűségének összehasonlítása a kontrollminták optikai sűrűségével, az eredmények matematikai feldolgozása. A páciensben lévő antitestek mennyisége közvetlenül függ az adott lyuk optikai sűrűségének magasságától.
A gyakorlatban jellemzően 96 lyukú lemezeket használnak.
A tesztfolyadék optikai sűrűségének (OD) mérésekor kiszámítjuk az antitestek mennyiségét (vagy koncentrációját) egy bizonyos térfogategységben. Az eredményt ezután összehasonlítják egy kontrollmintával.
Emlékezni kell:Minden tesztrendszerhez egyedi mutatókat dolgoznak ki az eredmények rögzítésére, a normalitás és a patológia mutatóit (vagyis „referenciaértékeket”). Ezt figyelembe kell venni az egyes konkrét vizsgálatok eredményeinek értékelésekor. Helytelen egy laboratórium eredményeit egy másik laboratórium „referenciaértékei” alapján értelmezni. Ugyancsak helytelen a különböző laboratóriumok eredményeinek összehasonlítása egymással.
Az ELISA reakciók végrehajtásakor az antitest aviditás fogalma is fontos.
Antitest aviditás
- ez az ellenanyag és az antigén közötti kapcsolat erőssége, valamint az immunglobulinokkal (antitestekkel) kapcsolatban álló antigén mennyisége. Az Avidity rendelkezik nagy érték a fertőzés várható időtartamának felmérése során, ami rendkívül fontos terhes nők elsődleges fertőzésének diagnosztizálásánál.
Az antitest aviditási teszt alapja az immunkomplex (antigén-antitest) karbamid oldattal történő kezelése a fehérje elpusztítása érdekében. A nagy aviditású kötések érintetlenek maradnak, míg az alacsony aviditású kötések megsemmisülnek. Az eredményt százalékban (%) kifejezett aviditási indexként adjuk meg.
2. Az autoimmun betegségek markerei és az emberi immunitás indikátorai(összes IgE, összes IgG, összes IgA, összes IgM, összes IgD, szekréciós IgA, IgG 2, IgG4, CEC-ben keringő immunkomplexek, IgA és IgG gliadinhoz és mások)
3. Onkológiai markerek(TNF - tumor nekrózis faktor, CEA - karcinoembrionális antigén, PSA - prosztata-specifikus antigén, hCG - humán chorion gonadotropin, CA 125, alveomucin és még sokan mások)
4. Reproduktív rendellenességek I (ösztradiol, progeszteron, prolaktin, tesztoszteron, AFP-alfafetoprotein, FSH - tüszőstimuláló hormon és mások)
5. Betegségek pajzsmirigy (szabad és kötött T3, T4, tiroglobulin, pajzsmirigy-peroxidáz - TPO, pajzsmirigy-stimuláló hormon - TSH).
Ez a lista nem tartalmazza az összes olyan betegséget, amelyet enzim immunoassay segítségével diagnosztizáltak.
Az ELISA reakció leggyakoribb anyaga a beteg éhgyomorra vett vérszéruma. Az anyag lehet még agy-gerincvelői folyadék, magzatvíz, üvegtest tartalom, nyálka nyaki csatornaés húgycső, kenetek.
Az anyag enzimes immunológiai vizsgálata gyorsan, 24 órán belül megtörténik. Különböző laboratóriumokban késések fordulhatnak elő bizonyos mennyiségű szérum felhalmozódása miatt.
Az egyes fertőzések eredményeinek értékelésekor fontos a kimutatott antitestek osztálya és mennyisége. Nemcsak a fertőzés etiológiájának kérdése (létezik-e vagy sem), hanem a betegség várható stádiuma (akut, krónikus), valamint aktív fertőzés (akut vagy krónikus exacerbáció) jelenléte is. a vizsgálat ideje ettől függ.
A legkorábbi antitestek az IgM. Az esetleges fertőzés után 1-3 héttel kimutathatók, ami a fertőzéses folyamat akut fázisát jellemzi. Az IgM antitestek megjelenésének második helyzete egy krónikus folyamat aktiválása (vagy súlyosbodása). Az IgM antitestek átlagosan körülbelül 3 hónapig keringenek, majd számuk fokozatosan eltűnik. Egyes betegeknél azonban a fertőzést követő 1-2 éven belül nyomokban IgM kimutatható.
A modern tesztrendszerek nagyon érzékenyek, ami nem specifikus álpozitív eredményeket eredményez (gyakran terhes nőknél). Ezért ebben a betegcsoportban a pozitív IgM-et újra ellenőrizni kell!
Az IgA antitestek a fertőzés után 2-4 héttel jelennek meg, de egy hónapon belüli kimutatáshoz elegendő mennyiségben. A szérum IgA-t a lép, a nyirokcsomók és a nyálkahártyák plazma sejtjei szintetizálják. A szekréciós IgA a nyálkahártyákon koncentrálódik, hogy ellátja védő funkcióját - részt vesznek a helyi immunitásban.
A fertőzést követő 4. héttől kezdenek megjelenni IgG antitestek. A legtöbb fertőzésnél a titerük fokozatosan növekszik maximummal különböző kifejezések(átlagosan 1,5-2 hónap után), ekkor a titer alacsony szinten marad és immunitást jelez. Egyes betegségekben (mikoplazmózis, chlamydia, trichomoniasis) az IgG szintje nem magas, és jelentősen csökken az immunitás hiánya miatt ezekben a fertőzésekben.
Az IgM antitestek izolált kimutatása primer antitest jelenlétére utal
fertőzés.
- Az IgM és IgG egyidejű kimutatása a vérben az elsődleges fertőzésre jellemző
az előző 2-3 hónapban, valamint egy krónikus betegség súlyosbodásakor. Ezért terhesség alatt az IgM jelenléte nem mindig az elsődleges fertőzés jele.
- Az izolált IgG kimutatása immunitást jelezhet ezzel a betegséggel szemben,
valamint krónikus fertőzés esetén. A második helyzetben mind az antitestek mennyisége (titer), mind ennek a titernek az időbeli változása fontos. A vizsgálatokat általában 2-4-6 hetes időközönként végzik.
- Az IgA izolált vagy IgM-mel történő kimutatása primer fertőzésre utal. at
Az IgA és az IgG megjelenése krónikus fertőzés aktiválódására utal (átlagosan 2 hét az exacerbáció pillanatától számítva).
Meghatározás IgG antitest aviditás kiváló kiegészítő szakasza a régóta fennálló fertőzésből származó primer fertőzés diagnosztizálásának, melynek klinikai jelentősége elsősorban a magzat méhen belüli fertőzésének kockázatának felmérése során van. Az alacsony aviditású IgG kimutatása primer fertőzésre utal, és átlagosan a fertőzés után 4-6 hónappal észlelhető, ritkán hosszabb ideig. Az alacsony aviditású IgG az elsődleges fertőzés (IgM) egyéb laboratóriumi megerősítését igényli. A nagy aviditású antitestek vagy egy krónikus betegség és annak súlyosbodásának, vagy a kialakult immunitás jelei.
Jellemzők csecsemőknél:egy év alatti, néha 1,5 éves gyermekeknél az anyai IgG különböző fertőzésekhez a vérben kering (vagyis a méhlepényen keresztül az anyától a magzatig terjed méhen belüli fejlődés). Önmagukban nem jelzik a fertőzés jelenlétét a jelenben. Ha ebben a korban IgM-et észlelnek (ne feledje, hogy az anyai IgM nem tud áthatolni a placentán), akkor ez méhen belüli fertőzés vagy születés után szerzett fertőzés jele.
Az ELISA diagnosztika (enzim-immunoassay analizátorral) eredményét bizonyos mértékegységekben adják meg:
- A minta optikai sűrűsége (OD) – a specifikus antitestek térfogategységenkénti koncentrációja. Minél nagyobb a minta OD-ja, annál nagyobb az antitestek koncentrációja. Egyes eredmények a pozitivitási együtthatóra (CP) utalnak, amely egyben a minta optikai sűrűsége is.
- Az antitestkoncentráció egységei (nanogram/milliliter vagy ng/ml).
- Szérumtiterek formájában: 1:20, 1:40, 1:100, 1:200, 1:400, 1:800, 1:1200 és így tovább. A diagnosztikai titerek (amelyeknél a betegség diagnosztizálása történik, és nem a fertőzés ténye) különböző betegségek esetén eltérőek.
- Szimbólumok formájában – „+”, „-”, „?” (+, ++, +++, ++++).
- A formában minőségi értékelés adott kritérium szerint (pozitív vagy negatív).
Csak az orvos tudja helyesen felmérni az antitestek számát, az immunglobulinok osztálybeli kimutatásának lehetőségét, és ezért meghatározhatja a betegség stádiumát és a kezelés szükségességét.
Nem szabad megfeledkeznünk arról, hogy minden tesztrendszerhez kidolgozzák a saját „referenciaértékeit” (a norma változatait), amelyek túllépése esetén egy adott betegséget diagnosztizálnak (a patológia változatai). A különböző tesztrendszereknél a „referenciaértékek” eltérőek.
Az ELISA eredmények időben történő helyes összehasonlítása csak akkor lehetséges, ha azokat ugyanabban a laboratóriumban állították elő.
A fertőző betegségek orvosa, N. I. Bykova
Az ELISA vagy enzim-linked immunoszorbens assay szerológiai vizsgálatokra utal, és a vérszérumban lévő kóros mikroorganizmusok kimutatására és diagnosztizálására szolgál.
Az elemzés révén különféle immunglobulin osztályok baktériumoknak: IgM- akut esetén kóros folyamat, A IgG a gyógyulási szakaszban, amely bizonyos esetekben az egész életen át fennáll.
Az enzim immunoassay diagnosztika segítségével különféle etiológiájú betegségeket észlelnek:
Az ELISA a szifilisz diagnosztizálására is javallt, ha a pozitív eredményeket az RT-módszer megerősíti, és lehetővé teszi a kezelés hatékonyságának nyomon követését a kóros folyamatban.
Enzim-immunoassay-t az indikációknak megfelelően írnak elő (mikroorganizmus-fertőzés gyanúja esetén), kötelező terhesség alatt és azt megelőzően. sebészeti műtétek különböző baktériumok hordozásának kimutatására.
Pozitív eredmény Az ELISA-t az IgG és IgM osztályba tartozó immunglobulinok jelenléte igazolja. A vérben kimutatott titerek Az IgM mindig betegséget jelez progresszív stádiumban az egészséges ember nem rendelkezik ezekkel az antitestekkel.
Az IgG pedig korábbi fertőzést vagy kórokozó mikroorganizmusok szállítását jelzi, amelyek egy része kis mennyiségben a normál határokon belül van. Például a streptococcus és a staphylococcus baktériumok minden emberi szervezetben jelen vannak.
A szifilisz elleni IgM antitesteket a fertőzés után 2 héttel észlelik, és kezeléssel primer, másodlagos vagy veleszületett epizód jelenlétét jelzik, körülbelül hat hónap múlva eltűnnek, kezelés nélkül - 18 hónap után. Ha mindkét típusú immunglobulint egyidejűleg észlelik, a szifilisz akut fázisban igazolódik. Beteg emberekben A szifilisz elleni IgG antitestek egy életen át a szérumban marad.
Az IgM-től a vírusos hepatitisig gyakran kimutatható lappangási időszak betegségek, az első megnyilvánulások megjelenése előtt és a betegség lefolyása alatt, gyógyulás után is fennállnak - nem határozzák meg. A kivétel az vírusos hepatitis C, amelyben az IgM aktív és látens vagy krónikus stádiumában egyaránt kimutatható
A hepatitis A elleni IgG antitestek még azokban is előfordulhatnak egészséges emberek, ami a korábbi fertőzésnek vagy a csökkent immunitásnak köszönhető, és az IgG jelenléte a hepatitis B, C és D esetében egészséges embereknél nem figyelhető meg.
A CMV-fertőzés szinte mindenhol elterjedt, és nem jelent veszélyt a közegészségügyre. Ez azonban halálos veszély újszülöttreés a magzat az intrauterin fertőzés során.
A citomegalovírus elleni IgM antitestek kimutatása elsődleges fertőzést vagy a látens fázis aktiválódását jelzi. Az IgG-titerek 10 évig megmaradnak a betegségből felépült emberekben.
Egészséges emberekben általában hiányoznak a herpeszvírus elleni antitestek. Az IgM tartalom a betegség akut fázisát jelzi, az IgG - a látens fázist (ebben az esetben a személy a fertőzés hordozója). Ha a herpesz IgG-je van, tudnia kell, hogy a vírus a látens szakasztól a progresszív szakaszig bármikor aktiválódhat.
at bárányhimlőés a kezelés után 2 évig az IgM osztályba tartozó immunglobulinok a vérben maradnak. Normális esetben egészséges emberekben nem mutatják ki a bárányhimlő elleni antitesteket.
Minden ember rendelkezik immunglobulinokkal a staphylococcusokkal és a streptococcusokkal szemben. Ezért lehetőség van az ezen baktériumcsoportok által okozott kóros folyamat diagnosztizálására kettős enzimes immunoassay módszerrel. Ha a titerek megnövekednek az ismételt ELISA során (egy héttel az első után), akkor az elemzést megerősítettnek tekintik.
A chlamydia pozitív eredményét az azonosítás jelzi IgM titerek 1:8és magasabb és osztály IgG – 1:64és magasabb, amelyek a betegség lefolyása során növekednek és magas értékeket érnek el. Például a chlamydia tüdőgyulladásban szenvedő gyermekeknél a titerek 1:2000-1:4000-re emelkednek. Az IgM jelenléte a chlamydia aktivitását jelzi a fertőzés után, az IgG globulinok kimutathatók a vérben.
Negatív enzim immunológiai vizsgálatot jelez IgM antitestek hiánya. A kimutatható IgG nem minden esetben tekinthető a diagnosztikai teszt megerősítésének, gyakran fennáll a fertőzés után több évig, néha életen át.
A szifilisz után, fertőző mononukleózis IgG immunglobulinok egész életen át fennmaradnakés kimutathatók a vérszérumban. 10 évig megmaradnak a CMV, a kanyaró, a rubeola és a toxoplazmózis mikroorganizmusai.
Az amoebiasis titerek több hónaptól több évig is fennállnak. A staphylococcus és a streptococcus baktériumok elleni antitestek kis mennyiségben teljesen minden emberben kimutathatók.
A fenti esetekben az IgG immunglobulinok betegség utáni kimutatása lehetővé teszi, hogy az ELISA eredményt negatívnak tekintsük.
A terhesség első trimeszterében minden nő átesik teljes körű vizsgálat szervezet, amely magában foglalja az enzim immunoassay-t.
A toxoplazmózis, a CMV, a chlamydia, a 2-es típusú herpesz (genitális), a rubeola, az ureaplasma és a mycoplasma vizsgálata kötelező, mivel ezek a betegségek komoly veszélyt jelentenek a magzat fejlődésére. Képesek behatolni a gyermek testébe, megkerülve a placenta gátat.
És mindvégig különös veszélyt jelentenek terhesség első trimeszterébenés szinte mindig oda vezet méhen belüli magzati halál és spontán vetélés.
A fenti betegségekkel az a probléma, hogy gyakran tünetmentesen, látható nélkül jelentkeznek klinikai megnyilvánulásai, azonosítása pedig csak enzimkapcsolt immunszorbens diagnosztikával lehetséges.
Címfelismerés IgG rubeola ellen korábbi betegségre utal, és normális a terhesség alatt. IgG a CMV-hez szintén nem jelentenek különösebb veszélyt a magzatra, azonban nem zárható ki az exacerbáció lehetősége (megnyilvánulási gyakoriság kb. 1-2%).
Különös veszélyt jelent az IgG jelenléte a 2-es típusú herpeszvírusra vagy a nemi szervekre (HSV2), mivel a szülés során jelentősen megnő az exacerbáció kockázata. A terhességi időszakban az akut fázis előfordulása az esetek 0,9% -ában fordul elő. A magzat herpeszvírussal való fertőzése a genitális traktus áthaladása során az esetek 40%-ában fordul elő, és 50%-ban halálhoz vezet.
Toxoplazmózis esetén az IgM a kezelés után akár 2 évig is fennmaradhat. A magzat fertőzésének kockázata ebben az esetben az első trimeszterben 17%, a harmadikban pedig 60% -ra nő, mivel a fertőzés fő útvonala transzplacentális. Azonosítva IgG toxoplazmózishoz sok szakértő hajlamos negatív eredményként értékelni az eredményt, ami gyakorlatilag nem jelent veszélyt a terhesség lefolyására.
Időről időre az orvosok ELISA-teszteket írnak elő, nem mindenki tudja, mi ez. Az ELISA a következő dekódolást tartalmazza: a vér enzimes immunoassay-je. Egy ilyen vérvizsgálat segít megérteni, hogyan küzd a szervezet a fertőző betegségekkel, és bemutatja a betegség fázisát. Az enzimes immunoassay segít felmérni a vér védőaktivitását, azonosítani az immunhiányt fertőzésekkel, hormonális problémákkal stb. összefüggő patológiákban.
Az ELISA vérvizsgálat vénából vett anyaggal működik. Ezen túlmenően, az üvegtest tartalma, a folyadék a gerincvelő, a húgycső vagy a nyaki csatorna kenetei. Az enzimhez kötött immunszorbens vizsgálathoz (ELISA) a magzatot körülvevő folyadék összegyűjthető terhes nőktől.
Ebben az esetben a vér közvetlenül ELISA-teszttel végezhető különböző technikák. Van közvetlen, közvetett, versengés és blokkolás. Amikor a szervezetet megfertőzik valamilyen kórokozóval, amelyet antigénnek neveznek, az immunrendszer specifikus antitesteket kezd termelni, például a hepatitis ellen. Ezek az antitestek arra irányulnak, hogy „küzdjenek” az idegen ágensekkel. Mik azok az antitestek? Ezek speciális fehérjék, amelyek kölcsönhatásba léphetnek az antigénekkel, és immunológiai komplexeket képeznek, amelyeket antigén-antitestnek neveznek. Ezeknek a komplexeknek a kimutatásáért az ELISA diagnosztika a felelős. Az antigén kimutatásához antitesteket adnak a kapott vérmintához, vagy fordított eljárást hajtanak végre.
A pozitív ELISA eredmény az immunrendszer és az enzimek reakcióján alapul. Az első hatására fertőző ágensek és sejtelemek kötődnek, a második segít az első eredményének vizualizálásában. Az immunreakció antitest és antigén kombinációt foglal magában. Ennek a folyamatnak az eredményeként immunkomplex képződik. Minden sejt felületén antigén található. Immun sejt a gyanúsat elfogják, és a felszínen rögzített antigént összehasonlító eljárásnak vetik alá a memóriába „töltött” információval. Ha van egyezés a leírásban, akkor a sejt hazatér, de ha nem, akkor kapcsolat jön létre, aminek létrejötte a felszínhez kötődő antitestért felelős.
Az enzimatikus reakció eközben lehetővé teszi, hogy az anyagok újakká alakuljanak át. Az anyagot enzimnek teszik ki. Ebben az esetben az enzimatikus különbséget különböző szubsztrátok biztosítják. A reakció eredményeként kapott terméket a kórokozó mennyiségének meghatározására küldjük, amelynek meghatározása az oldat színének sűrűségén alapul.
Enzim-immunoassay vérvizsgálatot írnak elő, ha allergia és vírusos eredetű betegségek diagnosztizálására van szükség. ELISA-teszt is létezik a szifiliszre és számos más olyan fertőzésre, amelyek nem védett szexuális érintkezés útján terjednek. Ez a diagnózis egyre népszerűbb a PCR-hez képest. A tény az, hogy a PCR magában foglalja a kenetekkel való munkát. A PCR-rel ellentétben az ELISA eredmények vérvizsgálatokból nyerhetők.
Ezenkívül ELISA módszerrel vérvizsgálat írható elő, ha szükséges az immunhiány jelenlétének megállapítása, az onkológia diagnosztizálása, a kezelés hatékonyságának felmérése, hormonális szintés átfogó preoperatív vizsgálaton kell átesni.
Ha összehasonlítja az ELISA-vizsgálatokat, például a PCR-rel, számos előnyt fedezhet fel. A fő dolog a lehetőség teljes körű diagnosztika még legfeljebb korai szakaszaiban fejlesztés. Ezenkívül az ELISA eredmények segítenek meghatározni a betegség konkrét stádiumát és fejlettségi szintjét.
Az ELISA analízis a PCR-hez képest több magas hatásfok Ezenkívül terhesség alatt is beveheti az STD-k kimutatására. Bárki, aki elvégezte ezt a tesztet, megtudhatja a TSH koncentrációját a vérszérumban. Ez nagyon fontos annak ellenőrzéséhez, hogy mi a pajzsmirigy reakciója, nincs-e működési rendellenesség.
További előnye azonban a polimeráz láncreakciónak, a vizsgálat gyorsasága, ami gyors eredményeket jelent. Az orvosok is nagyra értékelik az eredmények pontosságát. Ha STD-kről beszélünk, akkor a szint eléri a 98 százalékot, akárcsak a TSH koncentrációja.
Természetesen van néhány hátránya. Ebben az esetben azonban a teszt közvetett jellemzőiről beszélünk. Különösen arról van szó, hogy lehetetlen kizárni az esetleges hibákat a szabványok meghatározásában. Néha egy teljesen egészséges lány tesztje hamis pozitív eredményt, vagy ellenkező esetben negatív eredményt mutathat. Azonban a módszerek osztályozása pszichológiai kutatás a legtöbb esetben az ilyen hiányosságok nem megfelelő előkészítéssel vagy az anyaggyűjtési technika megsértésével járnak.
Az ELISA elemzéshez a legtöbb esetben vért adnak. Véradás előtt fontos, hogy legalább nyolc órát koplaljon, és kerülje a vizsgálat eredményét befolyásoló számos gyógyszer szedését. Beszélünk az antihisztaminokról és hormonális gyógyszerek befolyásolja a pajzsmirigy működését. Ezenkívül az alkoholt legalább 24 órával korábban ki kell zárni. Győződjön meg arról, hogy a véradás előtt legalább egy órával nem dohányzik. Az eredmény torzulása kábítószer-fogyasztás esetén is lehetséges.
Mielőtt rátérnénk az átiratra, érdemes megemlíteni, hogy milyen mérési módszereket alkalmaznak egy ilyen teszthez. A vizsgálat eredménye az Ig antitesteket vagy immunglobulinokat jelzi. A korábban tárgyalt nagyon specifikus fehérjéket jelentik. A B-limfociták felelősek termelésükért, amint vírusok, baktériumok vagy gombák bejutnak a szervezetbe. Ötféle immunglobulin létezik, amelyeket a latin ábécé jelöl.
Különbségeik különböző molekulaformákhoz és tömegekhez kapcsolódnak. Különböző felezési idejük van, és különböző módon vesznek részt vagy nem vesznek részt a fertőző folyamatokban. Ugyancsak változó az az időkeret, amelyen belül a fertőzés fellépésétől kezdve észlelhetők.
Ha az immunglobulinokat molekulatömeg alapján osztályozza, akkor az IgM a legmagasabb mutatókkal rendelkezik. Az ilyen típusú immunglobulinok jellemzője, hogy nem tudnak átjutni a placenta gáton. Ha újszülöttnél IgM-et mutatnak ki a tesztben, akkor a magzati fertőzés jelenlétéről beszélünk.
Az emberi vér túlnyomó többsége IgG immunglobulinokat tartalmaz, amelyek közül a legkevesebb az IgE. A belső munkáról beszélünk fertőző folyamatok, különös jelentőséget kell tulajdonítani az A, M, G opcióknak. Az IgE markerként működik allergiás reakció. Az IgD csak a nyirokcsomók és a mandulák szöveteiben található. Ez a helyi immunitás megteremtése szempontjából fontos.
Ezenkívül az elemzés meghatározza az antigéneket. Nagy molekulatömegű anyagokat értünk ezeken, amelyek szerves eredetükről ismertek. Különösen a fertőző és más spektrumú betegségek kórokozóiról beszélünk. Ezen túlmenően olyan anyagokra is gondolunk, amelyek különböző sejtelváltozásokat jeleznek, amelyek számos betegségben elkerülhetetlenek. Egy immunkomplex is javallt, amely egy olyan antigén-antitest komplexet mutat, amely részt vesz az immunfolyamatban.
A gyártási idő általában attól függ, hogy melyik laboratóriumhoz fordult. Egyes laboratóriumok egy-két napon belül képesek eredményt adni, mások egy hétig tartanak. A késések oka lehet bizonyos mennyiségű szérum felhalmozódása.
Annak ellenére, hogy az ELISA-t az egyik legjobbnak tartják pontos módszerek ellenőrzések és hibák továbbra is előfordulnak. Az anyag felvételének eljárása, az anyag nem megfelelő szállítása és tárolása befolyásolhatja az eredmények helyességét. A gyógyszerek szedése, amint azt fentebb említettük, rejtett betegségek jelenléte. Az anyagcserezavarok vagy az immunhiány szintén nem teszi lehetővé a megfelelő mutatók elérését. Egy évig tartó életkorban az újszülötteknél is pontatlanok lehetnek a mutatók. Ez annak a ténynek köszönhető, hogy az anyai antitestek jelen vannak a szervezetben.
Ha már a dekódolásról beszélünk, az elemzési formák pozitív ill negatív előjel, amely az egyes immunglobulinosztályokra vonatkozó számítási eredményeket jelzi. A következő lehetséges lehetőségek.
A kimutatott IgG, IgA és IgM hiánya teljes gyógyulást jelez. Az olyan komponensek negatív eredménye, mint az IgM, IgA, IgG, a fertőzésekkel szembeni immunitás hiányát jelenti.
Az IgG pozitív és negatív eredményének kombinációja, az IgA pozitív IgM-mel kombinálva fertőzés jelenlétét jelzi a szervezetben. akut forma. A pozitív IgG eredmény és az IgA és IgM negatív mutatói a vakcinázás utáni időszaknak vagy a fertőzés következtében kialakult immunitásnak felelnek meg.
Az IgG, IgA pozitív vagy negatív eredményének és az IgM negatív eredményének kombinációja a fertőzés krónikus lefolyásában való jelenlétét jelzi. A három komponens pozitív eredménye: IgG, IgM, IgA a fertőzés súlyosbodását jelzi. szivárgás. Az ellenanyag-osztályok közvetlen tisztázása mellett az ELISA elemzés megfejtésének részeként az orvos információkat kap mennyiségi mutatók. Fontos hangsúlyozni, hogy a dekódolásért a kezelőorvosnak kell felelnie. Az a tény, hogy egyes összetevők kombinációja azt gondolhatja, hogy hamis eredményt kapott, ami a teszt megismétléséhez vezet. A független visszafejtés ebben az esetben haszontalan.
