Многие из клинически важных веществ, способных вызывать токсическое поражение почек. Большинство из них оказывает прямое токсическое действие на клетки известным или неизвестным способом. Другие могут повреждать почки непрямым путем, часто не очевидным из того, что мы знаем о данном веществе. Нефротоксический эффект многих веществ связан с образованием метгемоглобина.
При наличии у больного почечного заболевания следует быть особенно осторожным в отношении лекарств, в выведении которых из организма главную роль играют почки. При почечной недостаточности связывание кислых лекарственных веществ с белками значительно уменьшается из-за потери белков плазмы. Соединение с белками имеет важное значение не только для фармакокинетики, но и для клеточной токсичности во многих органах. Почечная недостаточность влияет также на процессы окисления и восстановления лекарственных веществ, на их конъюгацию с глюкуронидом, сульфатами и глицерином, на ацетилирование и гидролиз.
Лишь немногие нефротоксины можно рассмотреть здесь более детально. В больницах, несомненно, главная причина нефротоксической почечной недостаточности (около 25% из всех случаев острой недостаточности) - это применение антибиотиков, прежде всего аминогликозидов. Нефротоксичны стрептомицин, канамицин, неомицин, гентамицин, тобрамицин, амикацин и сисомицин. Они накапливаются в клетках проксимальных канальцев, вызывают образование цитосегросом (цитоплазматических органелл, способных сливаться с лизосомой для удаления нежизнеспособного материала) с амилоидными тельцами, увеличивают содержание ферментов и белка в моче, снижают клиренс креатинина; если токсическое действие не очень сильно выражено, оно обычно приводит к неолигурической почечной недостаточности. Аминогликозиды, по-видимому, синергичны в отношении токсичности с цефалоридином, цефалотином и метициллином. Из-за кумуляции токсичность может проявиться с задержкой или в начале повторного курса лечения. Полипептиды, например полимиксин, обладают прямым и предсказуемым нефротоксическим действием, так же как бацитрацин и фунгицид амфотерицин В. Тетрациклин с истекшим сроком годности может вызывать Фанкони-подобный синдром.
В развитии острого тубулоинтерстициального нефрита (ТИН), вызванного пенициллинами (особенно метициллинном), рифампином, сульфаниламидами или сочетанием триметоприма и сульфаметоксазола участвуют аллергические процессы .
Диагноз острого ТИН можно предполагать при повышенной температуре, эозинофилии, эозинофилурии, повышении уровня IgE и положительных результатах радиоизотопной визуализации почек с галлием; для подтверждения диагноза используется почечная биопсия.
Все ренттеноконтрастные агенты в некоторой степени нефротоксичны, особенно при внутриартериальном введении. К предрасполагающим факторам риска (помимо частого использования этих веществ) относятся тканевая гипоперфузия, уменьшение объема внеклеточной жидкости, почечная недостаточность, возраст старше 60 лет, единственная почка, диабет, миелома, гиперурикемия и сердечная недостаточность.
Нефропатия, связанная с приемом анальгетиков, бывает причиной примерно 2% почечных поражений в конечной стадии в США и 20% или более в Австралии и Южной Африке. В целом фактически все антивоспалительные болеутоляющие средства периферического действия потенциально нефротоксичны, а большинство центральных анальгетиков - нет. Салицилаты оказывают прямое нефротоксическое действие и выступают в роли синергистов при смешанных анальгетических нефропатиях. Трудно оценить, насколько широко они применяются в обычной практике.
Почти все нестероидные противовоспалительные анальгетики (они представляют собой ингибиторы простагландинсинтетазы разной эффективности) могут вызывать поражение канальцевого эпителия, гипоперфузию, некроз сосочков и хронический ТИН. Многие из них в настоящее время легко доступны.
Большинство тяжелых металлов накапливается в проксимальных отделах нефронов в связи с их транспортом или наличием участков связывания, например сульфгидрильных (SH) групп. Токсическое действие свинца наблюдается при пищевых извращениях, промышленных воздействиях, употреблении загрязненных воды, вина или других алкогольных напитков, на горнорудных предприятиях, при вдыхании дыма или продуктов сгорания бензина со свинцовыми добавками. Тетраэтилсвинец проникает через интактную кожу и легкие.
Проявления хронического свинцового отравления включают сморщенные почки, уремию, гипертензию, анемию с базофильной зернистостью, энцефалопатию, периферическую невропатию и синдром Фанкони. При более остром отравлении возможны спастические боли в животе (свинцовая колика). Частота токсических почечных поражений, вызванных ртутью, висмутом и таллием, в настоящее время, по-видимому, снижается, но нефротоксичность, связанная с воздействием кадмия, меди, золота, урана, мышьяка и железа, все еще распространена; последний из этих элементов может вызывать проксимальную миопатию при гемохроматозе и иных формах перегрузки железом, например у больных на диализе с множественными трансфузиями.
Нефротоксичность растворителей проявляется главным образом при вдыхании углеводородов (синдром Гудпасчера), действии метанола, гликолей и галогенсодержащих соединений, на^ пример четыреххлористого углерода и трихлорэтилена. Предполагается также участие галогенсодержащих анестетиков (например, метоксифлурана).
К лекарственным веществам, вызывающим иммунокомплексное поражение почек, протеинурию и многие признаки нефротического синдрома, относятся пеницилламин, каптоприл, левамизол и соли золота, вводимые парентерально при лечении ревматоидного артрита.
Ред. Н. Алипов
"Причины токсической нефропатии" - статья из раздела
Из множества существующих антигенов в медицинской практике наибольшее значение уделяется трем типам агглютиногенов крови. Одним из них является тип ответственный за проявление резус-фактора: если он присутствует на мембране эритроцита, диагностируют Rh+ группу крови, если отсутствует - Rh-. Если в состав резус-отрицательной крови попадают эритроциты с агглютиногенами Rh+, организм запускает реакцию иммунного ответа и начинает вырабатывать антитела к этому антигену, что становится причиной патологических состояний.
СПРАВКА! Резус-фактор — сложная многокомпонентная система из нескольких десятков антигенов. Наиболее часто встречаемые из них — агглютиногены типа D (85% случаев), а также E и C.
Пробу Кумбса проводят только при наличии прямых показаний. Общий список причин для назначения пробы Кумбса:
Более конкретные показания зависит от типа проводимого исследования.
Прямой тест позволяет обнаружить антитела на поверхности эритроцитов. Это необходимо для диагностики уже имеющихся гемолитических патологий :
СПРАВКА! Гемолитическая анемия - заболевание, связанное с преждевременным разрушением эритроцитов в результате гемолиза, что приводит к недостаточному насыщению крови кислородом и гипоксии головного мозга и/или внутренних органов.
Гемолиз кровяных элементов наблюдается при онкологических, инфекционных, ревматических заболеваниях, поэтому прямая проба Кумбса может использоваться как дополнительное средство диагностики патологического состояния. При этом стоит помнить: отрицательное значение анализа не исключает вероятность гемолиза, а является поводом для дополнительного обследования.
Непрямая проба чаще применяется для предотвращения патологических ситуаций. Она помогает выявить антитела в плазме крови, что необходимо для оценки совместимости при переливании и диагностики рисков резус-конфликта во время беременности.
Более 80% людей имеют положительный резус-фактор (Rh+), соответственно, чуть менее 20% являются резус-отрицательными. Если у Rh- матери развивается Rh+ ребенок, ее организм начинает вырабатывать антитела, атакующие эритроциты плода, провоцируя гемолиз.
С учетом того, что процент “разнорезусных” браков достигает 12-15%, риск гемолитической болезни новорожденных должен быть велик, но в реальности лишь в 1 из 25 подобных случаев у женщин наблюдается явление сенсибилизации (на 200 успешных родов 1 пример гемолитической патологии). Частично это обусловлено тем, что первый резус-положительный ребенок обычно не вызывает открытой агрессии организма матери; подавляющее количество случаев приходится на второго и последующих детей. Действует тот же принцип, что и при обычной сенсибилизации к тому или иному аллергену.
При первом контакте реакции не происходит. Организм только знакомится с новым для него антигеном, вырабатывая антитела класса IgМ, которые отвечают за быстрый иммунный ответ, но редко проникают через плацентарный барьер в кровь ребенка. Все патологические реакции проявляются при повторной “встрече”, когда в организме начинают вырабатываться антитела класса IgG, легко проникающие в кровоток плода, запуская процесс гемолиза.
Непрямая проба Кумбса при беременности позволяет обнаружить наличие антител в организме матери и вовремя выявить начальную стадию сенсибилизации. Положительный ответ, требует постановки на учет с ежемесячным исследованием титра антител и обязательной госпитализацией за 3-4 недели до родов.
СПРАВКА! Несовместимость по резус-фактору на состоянии матери никак не сказывается, гемолитическая болезнь развивается только у ребенка. В тяжелых случаях и при отсутствии своевременной реакции плод может погибнуть еще в утробе или сразу после рождения.
Для диагностики используют венозную кровь. Специальная длительная подготовка к проведению пробы Кумбса не требуется. Старайтесь соблюдать стандартный набор правил перед взятием крови из вены на анализ:
Метод исследования основан на реакции гемагглютинации.
При проведении прямой пробы на образец крови воздействуют заранее заготовленной антиглобулиновой сывороткой с известными показателями, выдерживают смесь некоторое время и проверяют на предмет агглютинатов, которые образуются при наличии на эритроцитах антител. Уровень содержания агглютинатов диагностируют с помощью агглютинирующего титра.
Непрямая проба Кумбса имеет сходную методику, но более сложную последовательность действий. В отделенную сыворотку крови вводят антигенные эритроциты (с резус-фактором) и только после этих манипуляций добавляют антиглобулиновую сыворотку для диагностики и титра агглютинатов.
В норме и прямая, и непрямая проба Кумбса должны давать отрицательный результат:
Положительная проба Кумбса говорит о факте резус-сенсибилизации организма, что является главной причиной резус-конфликта в случае переливания крови или при вынашивании ребенка с иным резус-статусом. В этом случае результаты сохраняются неизменными в течение 3-х месяцев (срок жизни эритроцитов). Если причиной стала аутоиммунная гемолитическая анемия, то положительная проба может преследовать пациента на протяжении нескольких лет (в ряде случаев - всю жизнь).
СПРАВКА! Антиглобулиновый тест отличается высокой чувствительностью, но имеет малую информативность. Он не регистрирует активность гемолитического процесса, не определяет тип антитела и не в состоянии выявить причину патологии. Для получения более полной картины, лечащий врач обязательно назначает дополнительные исследования (микроскопию крови, общий и биохимический анализ, ревмопробы, СОЭ, уровень железа и ферритина).
Степень сенсибилизации может иметь качественное выражение (от «+» до «++++») или количественное - в виде титра:
Причиной положительной пробы могут стать:
Ни одна из вышеперечисленных проблем не может быть решена пациентом без врачебной помощи. Во всех случаях потребуется срочная консультация, постановка на учет или экстренная госпитализация.
ВНИМАНИЕ! В редких случаях возможна ложноположительная проба Кумбса. Причиной этого могут стать частые переливания крови, а также ряд заболеваний: ревматоидные артриты, красная волчанка, саркоидозы. Также это явление может наблюдаться после удаления селезенки, а также при нарушении хода реакции (частые встряхивания содержимого, наличие загрязняющих примесей).
Принцип антиглобулинового . Антиэритроцитные антитела неполного типа и молекулы комплемента (С), находящиеся на поверхности эритроцитов выявимы - прямой тест - их агглютинацией в контакте с животной сывороткой, содержащей антитела на человеческий антиглобулин (антиглобулиновая сыворотка). Свободные в сыворотке неполные антитела выявляются - косвенный тест - их закреплением на смеси нормальных эритроцитов группы 0, все антигены которых принадлежат известной резус-системе, далее агглютинируемые под воздействием антиглобулиновой сыворотки.
Материалы, реагенты антиглобулинового теста Кумбса : пробирки на 10/100 мл; градуированные пипетки на 1, 2 мл; пастеровские пипетки; штативы; предметные нешлифованные стекла; 8,5‰ раствор NaCl; эритроциты. Эритроциты больного, равно как и принадлежащие к группе 0 получим из свежеотобранной крови на противосвертывающем веществе (раствор ЭДТА).
Эритроциты группы 0 отобрать с таким расчетом, чтобы они исходили от лиц в норме и содержали все антигены резус-системы . Их можно сохранять до 7 дней в аутологической плазме, при температуре + 4°С. В случае отсутствия эритроцитов группы 0, известной антигенной мозаики, можно использовать смесь эритроцитов группы 0, резус-положительных и резус-отрицательных эритроцитов.
Сыворотка больного должна быть свежеотобранной.
Антиглобулиновая сыворотка производится институтом им. д-ра И. Кантакузино, выпускается в лиофилизированном виде в содержащих 1 мл ампулах. После растворения сыворотку хранить при температуре -20°С.
Техника антиглобулинового теста Кумбса
:
а) Прямой тест Кумбса
: эритроциты больного промыть 3 раза 8,5‰ раствором NaCl.
На несколько предметных стекол нанести по крупной капле из разведений антиглобулиновой сыворотки, а рядом - по маленькой капле из осадка эритроцитов больного; перемешать капли углом стекла. Приготовленный материал оставить на столе 5 мин., затем исследовать на наличие агглютинатов. В случае положительного результата определить максимальный агглютинирующий титр.
б) Косвенный тест Кумбса : эритроциты группы 0, резусположительные и резус-отрицательные промыть 3 раза 8,5‰ раствором NaCl и подвергнуть воздействию сыворотки больного из расчета 2 капли эритроцитов на 8-10 капель сыворотки, затем, в течение 60 мин., провести инкубацию при температуре 37°С. После этого снова трижды промыть эритроциты и воздействовать на них антиглобулиновой сывороткой, по указаниям для прямого теста Кумбса.
Когда речь идет о холодовых активных антителах сенсибилизацию эритроцитов группы 0 провести 60 мин. при температуре + 4°С.
Примечание : 1) Не проводить прямой тест Кумбса на эритроцитах, сохраненных один или несколько дней при температуре + 4°С или комнатной температуре, поскольку результаты могут оказаться ложноположительными за счет фиксации имеющихся в нормальной сыворотке непол ных, активных на холоде антител. 2) В случаях выраженной гиперпротеинемии промывать эритроциты 4-5 раз и проверить отсутствие сывороточных белков в последней промывной жидкости, с помощью сулфосалициловой кислоты.
Возможный остаток 2 мкг IgG/мл в эритроцитном осадке может нейтрализовать антиглобулиновую сыворотку . Тест Кумбса можно проводить и с помощью моноспецифических анти-IgG, -IgM, -IgA -С3 и -С4 сывороток в целях уточнения вида, находящихся на поверхности эритроцитов глуболин, например, у страдающих аутоиммунной гемолитической анемией.
Реакция Кумбса - эффективный метод выявления антигенов эритроцитов и антиэритроцитарных антител крови человека в непрямой реакции агглютинации. Основа теста - использование при типировании антигенов эритроцитов специфических моноклональных реагентов на основе иммуноглобулинов класса G (IgG) с последующим применением на втором этапе реакции антиглобулиновой сыворотки Кумбса (АГС).
АГС производится путем смешивания сыворотки из крови лабораторных животных, иммунизированных иммуноглобулинами класса G человека, и моноклональных антител к одному из компонентов - C3D комплементу сыворотки человека. АГС вызывает агглютинацию эритроцитов, сенсибилизированных специфическими антителами. При отсутствии антител на эритроцитах под воздействием АГС положительная реакция не происходит.
Непрямая реакция Кумбса позволяет определить наличие:
Приводим методику непрямой реакции Кумбса на примере цоликлона анти-D IgG.
В норме антитела к эритроцитам в крови отсутствуют.
Прямая проба Кумбса - антиглобулиновый тест (агглютинация в геле, позволяет выявить полные двухвалентные антитела), с помощью которого определяют антитела класса IgG и С3-компонент комплемента на поверхности эритроцитов. Обычно антитела, выявляемые прямой пробой Кумбса, имеют широкую специфичность, не ассоциированную с хорошо установленным антигеном. Положительная прямая проба Кумбса чётко указывает на наличие у больного гемолитической анемии, хотя не все больные с положительным прямым антиглобулиновым тестом страдают этим заболеванием. Приблизительно у 10% больных антитела или компоненты комплемента на мембране эритроцитов не удаётся определить прямой пробой Кумбса (тест отрицательный), но тем не менее они страдают аутоиммунной гемолитической анемией. Для уточнения специфичности антител в таких случаях используют тесты с их элюцией. Прямая проба Кумбса, положительная только к комплементу, обычно имеет отношение к холодовым антителам типа IgM. В этом случае антитела IgM не присутствуют на эритроцитах при базальной температуре тела. Однако вследствие того, что антитела IgM активно фиксируют комплемент, и комплемент остаётся на эритроцитах, при данной форме аутоиммунной гемолитической анемии (болезнь холодовых аггютининов) проба Кумбса будет положительна только к комплементу.
Прямая проба Кумбса положительна при аутоиммунной гемолитической анемии, вызываемой тепловыми антителами, аутоиммунной лекарственной анемии (при приёме метилдофа до 20% больных имеют положительную реакцию), лекарственно-адсорбционном типе гемолитической анемии, иммунокомплексном типе гемолитической анемии (проба положительна только по отношению С3), при аутоиммунной гемолитической анемии, вызываемой холодовыми антителами - болезни холодовых агглютининов (проба положительна только по отношению С3). При пароксизмальной холодовой гемоглобинурии прямая проба Кумбса отрицательная.
Непрямая проба Кумбса - непрямой антиглобулиновый тест (обнаруживает неполные антитела) позволяет выявить атипичные антитела в крови, в том числе аллоантитела, к чужим антигенам эритроцитов. Свое название (непрямая) она получила вследствие того, что протекает в 2 этапа. Первоначально сыворотка крови больного, содержащая неполные антитела, взаимодействует с добавленным корпускулярным Аг-диагностикумом без видимых проявлений. На втором этапе внесённая антиглобулиновая сыворотка взаимодействует с неполными антителами, адсорбированными на антигенах, с появлением видимого осадка. Переливание гомологичных (аллогенных) эритроцитов или беременность - наиболее частые причины образования этих антиэритроцитарных антител. Сочетание положительной непрямой пробы Кумбса с отрицательной прямой пробой ничего не даёт для диагностики аутоиммунной гемолитической анемии. Положительная непрямая проба Кумбса вызывает определённые трудности при подборе крови для переливания и проведении перекрёстной пробы на совместимость с консервированной кровью, но не имеет другого диагностического значения.
