Цитохимические методы преследуют отождествление химических и ферментных веществ в клетках, используя для этого цветные реакции. Цитохимические препараты сохраняют клеточную структуру, что допускает выявление клеток и внутриклеточную локализацию исследувмого составного. Вот почему в гематологии отдается предпочтение не биохимическим, трудоемким, разрушающим клеточную структуру о относящимся к весьма разнородной клеточной популяции, а цитохимическим способам.
Цитохимия доказала, что среди морфологически одинаковых клеток имеются существенные химические и ферментативные различия.
Принцип ШИК-реакции . Полисахариды выявляются путем реакции, окисляющей спиртные группы, которые преобразуются в альдегидные группы, и отождествления последних путем цветной реакции реагентом Шифф.
Реагенты для ШИК-реакции : 1. Закрепляющий смесь спирт-формалин: 9 частей абсолютного этилового спирта +1 часть 40% формалина; сохранять при температуре +4°.
2. Периодння кислота, 1% водный раствор. Раствор бесцветный. Хранить в бутылке из коричневого стекла, в темноте, при лабораторной температуре. Пожелтевший раствор неприменим.
3. Реагент Шиффа. Развести 1 г основного фуксина в 200 мл дистилированной воды при температуре кипения. Болтать 5 минут, охладить до температуры 50°, профильтровать и добавить 20 мл нормальной соляной кислоты. Охладить до 25°, добавить 2 г метабисульфита натрия или калия, которые полностью обеспечивают раствор. Раствор должен простоять сутки в условиях темноты и холода (+4°). Затем добавить 2 г активированного угля, поболтать 1 мин. и профильтровать.
Полученный фильтрат прозрачный и бесцветный. Допускается слегка желтоватый оттенок; если раствор розовеет, становится неприменимым. Хранить при температуре +4° в герметически закрытой бутылке из коричневого стекла.
4. Зеленый светлый -1% водный раствор.
5. Диастаз: неразжиженная слюна человека или 0,1% раствора амилолитического-диастатического фермента в физиологическом солевом растворе.
1) 10-тиминутное закрепление мазков смесью спирт-формалин; промывание дистилированной водой;
2) окисление 1% раствором периодной кислоты, 10 мин.; промывание дистилированной водой;
3) окраска реагентом Шиффа в накрытой посуде, в условиях темноты и холода, в течение 2 часов; промывание проточной водой;
4) контрастная окраска 1% зеленым-светлым в течение 1 минуты; промывание проточной водой.
Контрольный закрепленный мазок подвергается инкубации диастазом, 60 мин. в условиях комнатной температуры для выборочного удаления гликогена. После промывания дистилированной водой подвергается обработке по обычному методу.
Гликоген , окрашенным в багряно красный- цвет, представляется в виде зерен или рассеянный. Для контроля реакции используются зрелые гранулоциты мазка. Помимо гликогена ШИК положительную реакцию дают и другие вещества углеводной природы, такие как, муцин, мукопротеины, цереброзиды, фибрин. Дифференциация гликогена от этих составных осуществляется путем предварительной обработки диастазом, после чего гликоген более не окрашивается.
В гранулоцитах гликоген находится в рассеянном виде уже на стадии промиелоцита и начинает увеличиваться по мере созревания. В нормальных условиях лимфоциты отрицательны или в 20% из них могут находиться несколько мелких зерен гликогена. Моноциты отрицательные либо имеют тонкую зернистость.
Интенсивность окраски определяется полуколичественно. В реакция ШИК отражается в виде гликогенного показателя, или среднего показателя реакции (Астальди). Нормальный показатель гликогена колеблется в пределах от 0,10 до 0,30. Обычно лишь у патологических лимфоцитов наблюдается степень нагрузки более 3.
Значилось метода ШИК-реакции
:
а) При постановке дифференциального диагноза отдельных цитологических видов острой лейкемии:
- Миелобласты и промиелоуиты ШИК-отрицательные или приобретают слабую диффузную окраску. Тела Ауера дают положительную реакцию, которая ослабевает после переваривания со слюной.
- Лимфобласты при острой лейкемии и лимфосаркоме дают резкую ШИК-положительную реакцию в виде зерен или крупных блоков гликогена.
- Эритробласты при эритремии и острой эритролейкемии дают резко положительную рассеянную или зернистую реакцию, в противоположность нормальным эритробластам, которые ШИК-отрицательные;
- Моноцитоидные б ласты непостоянно слабо положительные, с тонкой зернистостью.
б) В целях постановки диагноза и наблюдения за эффективностью лечения при хронической лимфатической лейкемии: завышенный показатель гликогена указывает на тяжелую форму заболевания и тяжкий прогноз.
Рост гликогена
в патологических лимфоцитах не характерное для лейкемии явление, оно объясняется ростом метаболической активности при любом виде лимфоидной пролиферации.
в) Для дифференциации клеток Гоше от иных макрофагов с накоплением.
Аллергены и токсины
Диагностические препараты
Иммуноглобулин противококлюшный антитоксический человека (Россия)
Сыворотка противодифтерийная лошадиная очищенная концентрированная жидкая (Россия)
Сыворотки и иммуноглобулины
Вакцина туберкулезная БЦЖ-М сухая (для щадящей первичной иммунизации, Россия)
Вакцина туберкулезная (БЦЖ) сухая для внутрикожного введения (Россия)
Акт-Хиб (Hib-вак, Южная Корея)
Коклюшная моновакцина (Россия)
Содержит коклюшные бактерии, консервант – мертиолят. Используют только по эпидпоказаниям вочагах коклюшной инфекции.
Содержит в 1 дозе 10 мкг полисахарида Haemophilus influenzae тип b, конъюгированного со столбнячным анатоксином, консервант – трометамол. Применяют для вакцинации детей с 2 месяцев по эпидпоказаниям.
Mycobacterium bovis BCG-1. Вакцинный штамм получен путем длительного (в течение 13 лет) выращивания туберкулезных микобактерий бычьего вида в неблагоприятных условиях на картофельно-глицериновой среде с добавлением желчи. Применяют для специфической профилактики туберкулеза. Вакцинацию проводят в на 5-7 день жизни, когда организм свободен от микобактериальной инфекции. Ревакцинации подлежат все здоровые дети, подростки и взрослые до 30 лет, отрицательно реагирующие на туберкулин. Механизм иммунитета при туберкулезе полностью не раскрыт. В клинической практике основным критерием напряженности вакцинального иммунитета служит переход отрицательной кожной реакции на туберкулин в положительную.
Содержит лиофильно высушенные в 1,2%-ном растворе натрия глютамината живые бактерии вакцинного штамма Mycobacterium bovis BCG-1. Применяют для щадящей специфической профилактики туберкулеза (первичная вакцинация) у новорожденных в районах с неблагополучной ситуацией по туберкулезу.
Содержит антитела против экзотоксина дифтерийных палочек. Антитоксическую активность выражают в международных единицах (10000 и 20000 МЕ/мл). Применяют для лечения больных дифтерией. Кроме лечебных целей, противодифтерийную сыворотку используют для определения токсигенности культур дифтерийной палочки в реакции гелевой преципитации.
Содержит иммунологически активную фракцию плазмы крови доноров с антителами к экзотоксину коклюшного микроба (не менее 750 ЕД антитоксических противококлюшных антител). Применяют для лечения коклюша.
Содержит очищенный дифтерийный токсин в 0,2 мл препарата 1/40 DLM токсина для морской свинки. Применяют для внутрикожных проб с целью иммунодиагностики. У лиц в месте введения развивается воспалительная реакция. Если в крови содержится более 0,03 ME антитоксина, проба отрицательна. Ранее пробу Шика использовали часто для выявления лиц, восприимчивых к дифтерии. В настоящее время из-за возможности осложнений ее применение ограничено строгими эпидемическими показаниями.
Аллергены бактериальные или инфекционные представляют собой взвесь убитых микробных клеток или извлеченных из них различных фракций и применяются в качестве диагностических препаратов для выявления повышенной чувствительности организма к возбудителям инфекционных заболеваний.
Бактериальные экзотоксины (дифтерийный, скарлатинозный), используются для кожных проб при определении антитоксического иммунитета к этим заболеваниям.
Аллергические кожные пробы применяются с целью диагностики при многих инфекционных заболеваниях, сопровождающихся аллергической перестройкой организма. В зависимости от способа введения аллергена кожные пробы могут быть аппликационные - при определении чувствительности к некоторым лекарственным, химическим веществам; скарификационные - при определении чувствительности к бытовым, пыльцевым, эпидермальным аллергенам и внутрикожные - при определении чувствительности к бактериальным и грибковым аллергенам.
Диагностическое значение реакций организма на аллергены различно в течение инфекционного процесса. В начале инфекционного процесса положительная реакция свидетельствует только о зараженности определенным возбудителем и состоянии аллергии к нему и не может расцениваться как диагностическая. В разгар заболевания аллергическая проба учитывается как диагностическая. После некоторых инфекционных болезней остается аллергия к соответствующему возбудителю в течение нескольких лет, обнаружение которой свидетельствует о перенесенной инфекции. При положительной реакции на аллерген, учитываемой через 20 минут, а затем через 24 и 48 часов (редко 7 суток), ощущается чувство жжения на месте введения препарата, появляется покраснение, отек, может быть везикула.
Аллергены, применяемые с диагностической целью, разнообразны по химической природе и методам получения.
Ниже приводится описание некоторых диагностических препаратов, вошедших в широкую практику.
1. Туберкулин. В настоящее время выпускаются три препарата для проведения аллергических туберкулиновых проб:
альттуберкулин Коха, сухой очищенный туберкулин (РРД) и очищенный туберкулин в стандартном разведении.
Альттуберкулин Коха (АТК)-желтовато-коричневая жидкость, получаемая в результате выпаривания до 1/10 первоначального объема 5-6-недельной культуры микобактерий, выращенной на глицериново-мясо-пептонном бульоне. Старый туберкулин Коха содержит продукты жизнедеятельности и распада микобактерий и питательную среду. Препарат должен содержать не менее 90000 ТЕ (туберкулиновых единиц) в 1 мл.
Сухой очищенный туберкулин (РРД)- (Derivatum protei nos purificatum tuberculini mammalinii) представляет собой белковый препарат, полученный из фильтрата культуры микобактерий туберкулеза осаждением химическими веществами с последующей очисткой. В 1 мл очищенного сухого туберкулина содержится 50000 ТЕ. Препарат применяется для внутрикожных проб по Манту, подкожной пробы Коха и других тестов.
Очищенный туберкулин в стандартном разведении (РРД-2) приготовлен из порошка-туберкулина разведением его в растворителе (твин-80), обеспечивающим стабилизацию биологической активности препарата - 2 или 5 ТЕ в 0,1 мл.
Применяется только для постановки внутрикожных проб по Манту.
Преимуществом очищенных туберкулинов является их большая чувствительность и стандартность.
Туберкулиновая диагностика проводится с целью определения инфицированности населения, особенно детей и подростков, туберкулезом; при отборе людей, подлежащих прививкам против туберкулеза; определения эффективности вакцинации и т. д.
При массовой туберкулиновой диагностике применяют внутрикожную пробу Манту, используя очищенный туберкулин в стандартном разведении.
При отсутствии у обследуемого человека инфицированности микобактериями туберкулеза наблюдается отрицательная реакция; при размере инфильтрата 2-4 мм - проба сомнительная, поэтому реакцию следует повторить через 3-4 недели. Если инфильтрат более 5 мм - реакция расценивается как положительная.
2. Тулярин содержит убитые нагреванием при 70°С микроорганизмы в 3%-ном глицерине, применяется для внутрикожного введения при диагностике туляремии, начиная с 3-5-го дня болезни. Проба с тулярином применяется также для определения посгвакцинального иммунитета.
3. Бруцеллин - представляет собой фильтрат 3-недельной (убитой нагреванием) бульонной культуры всех трех видов бруцелл.
Препарат вводится строго внутрнкожно при диагностике бруцеллеза и при определении иммунитета у вакцинированных людей (кожная проба Бюрне).
4. Токсоплазмин - антигенный комплекс, полученный из экссудата брюшной полости мышей, зараженных внутри брюшинно возбудителем токсоплазмоза. Препарат не должен содержать жизнеспособных токсоплазм.
Токсоплазмин применяется для диагностики при заболеваниях, подозрительных на токсоплазмоз - при акушерской патологии, поражении глаз, лихорадках неясной этиологии и т. п.
5. Антраксин - препарат, содержащий белково-полисахаридно-нуклеиновый комплекс, полученный путем гидролиза сибиреязвенных бацилл. Антраксин используется для диагностики у больных сибирской язвы, для определения состояния аллергии у иммунизированных людей и у перенесших эту инфекцию. Аллергическая проба положительна уже в первые дни заболевания.
6. Дизентерии - является белковой фракцией двух возбудителей дизентерии шигелл Флекснера и Зонне и используется в качестве дополнительного средства диагностики при подозрении на дизентерийную этиологию желудочно-кишечного заболевания у людей всех возрастов.
7. Бактериальные аллергены из таких микроорганизмов как стафилококки, стрептококки, пневмококки, нейссерии катаральные, эшерихии, энтерококки, протеи, ложнодифтерийные палочки получают в виде очищенных термостабильных фракций фильтратов 5-6-суточной бульонной культуры (метод Андо-Вержиковского) или в виде нативных препаратов -инактнвированной взвеси бактерий, содержащей и продукты метаболизма. Очищенные бактериальные аллергены представляют собой извлеченные из микроорганизмов белки (до 83%) с небольшой примесью Сахаров и нуклеиновых кислот.
Препараты предназначены для выявления повышенной чувствительности организма к микроорганизмам, из которых они получены.
Бактериальные экзотоксины (дифтерийный и скарлатинозный) применяются для определения антитоксического иммунитета к дифтерии в реакции Шика и к скарлатине в реакции Дика.
Дифтерийный токсин готовят из очищенного экзотоксина, после двухлетней выдержки, разведением в глицерино-желатиновой смеси с таким расчетом, чтобы в 0,2 мл содержалось 1/40 Dim для морской свинки. Токсин вводят в дозе 0,2 мл строго внутрикожно в среднюю часть ладонной поверхности предплечья. При положительной реакции на токсин (т. е. при отсутствии антитоксического иммунитета у обследуемого), учитываемой через 72-96 часов, на месте введения появляется инфильтрат и эритема от 15 до 30 мм. Следовательно не обходимо дополнительное вакцинирование против дифтерии.
Детям с отрицательной реакцией Шика (при отсутствии местных изменений вследствие нейтрализации антитоксинами введенного токсина) дополнительных прививок не проводят.
Скарлатинозный токсин (эритрогенный) - термостабильный нуклеопротеоид стрептококка, консервированный фенолом (0,2%) или мертиолатом (в разведении 1: 10000). Скарла тинозный токсин дозируется в так называемых кожных дозах, причем за одну кожную дозу принимается такое количество токсина, которое при внутрикожном введении кролику вызывает воспаление (15-20 мм). Для определения напряженности иммунитета против скарлатины детям строго внутрикожно вводят скарлатинозный токсин в дозе 0,1 мл (одну кожную дозу для кролика). Учет реакции проводят через 18-24 часа.
Положительной реакцией, свидетельствующей об отсутствии иммунитета к скарлатине, считается образование в месте введения эритемы, размером от 20-30 мм и более при резко положительной реакции.
ШИКА РЕАКЦИЯ (Schick) предложена в 1913 г. для определения степени восприимчивости к дифтерии. Ш. р. выполняется путем строго внутрикожного введения дифтерийного токсина в объеме 0,2 см 3 , заключающих 1 / 40 Dim (см. Дифтерия). Токсин вводится в кожу левой руки; в кожу правой руки вводится для контроля такое же количество токсина, прогретого при 100° в течение 10 мин. Результаты впрыскивания отмечаются через 24 и 96 часов, при этом могут наблюдаться следующие явления: 1. При полном отсутствии реактивных явлений на месте впрыскивания «контрольного» (гретого) токсина на месте впрыскивания активного токсина появляются краснота и инфильтрат, сопровождающиеся ощущением легкого жжения и зуда. Явления эти развиваются в первые сутки, достигают максимума на четвертые сутки, затем исчезают, оставляя на некоторое время пигментацию кожи. По величине красноты и инфильтрата можно судить о степени реакции, которая обозначается так: + («сомнительная» реакция-при неясно выраженном инфильтрате и легкой красноте), + (при красноте в диаметре не более 1,5 см), + + (если краснота имеет диаметр от 1,5 до 3 см) и + + + (если краснота больше 3 см); этот тип реакции называется «положительной» Ш. р. 2. При отсутствии каких-либо реактивных явлений на месте впрыскивания как гретого, так и активного токсина говорят об «отрицательной» Щ. р. 3. Если реактивные явления отмечаются на обеих руках в одинаковой степени, то такое явление обозначается как «ложная» Ш. р. Степень ложной (с гретым токсином) реакции отмечается (подобно положительной) одним, двумя, тремя знаками. Реакция на гретый токсин имеет нек-рые качественные отличия от реакции на активный токсин: быстрое появление и исчезновение (обычно в течение 36-48 час.) и преобладание эксудативных явлений над инфильтративными. 4. Если реактивные явления отмечаются на обеих руках, но степень их разная, то говорят о «комбинированной» Ш. р.-при преобладании явлений на стороне активного токсина, и об «извращенной» Ш. р.-при преобладании явлений на стороне гретого токсина. Общепринятые представления о сути Ш. р. сводятся к следующему: если в крови испытуемого субъекта не имеется антитоксина или он содержится в количестве, меньшем, чем "/зо -А-Е в 1,0 сыворотки, то впрыскиваемый вну- трикожно токсин вызывает реактивные явления, обозначаемые как «положительная» Ш. р. Если же в крови испытуемого субъекта имеется достаточное количество антитоксина (по Шику 1 / 30 , по Берингу 1 / хоо и больше АЕ в 1,0 сыворотки), то последний производит нейтрализацию введенного токсина, и получается «отрицательная» Ш. р. Эти положения подтверждаются следующим наблюдением: если чувствительному к дифтерийному токсину субъекту ввести нейтральную смесь «токсин-антитоксин», то как правило при этом никакой реакции на месте инъекции этой смеси не наблюдается. Кроме того был проделан целый ряд одновременных прямых определений количества антитоксина в крови по способу Ремера параллельно с Ш. р. (Шик, Рамон, Вексель и др.). Эти опыты в большинстве случаев обнаруживают отмеченную зависимость результата Ш. р. от количества антитоксина в крови. Наблюдаемые иногда несоответствия между этими явлениями не могут поколебать общего правила, т. к. бывают они достаточно редко: Иенсен (Jensen) напр. отметил наличие отрицательных Ш. р. при ничтожном содержании антитоксина « I /i 00 AE в 1,0 сыворотки) в 9% случаев. При оценке результатов Ш. р. необходимо учесть, что в раннем грудном возрасте нередко наблюдается отрицательная Ш. р. при отсутствии антитоксина в крови. Это объясняется присущей раннему детскому возрасту анергией кожи. Что касается т. н. ложной Ш. р. и ее вариантов (комбинированная, извращенная Ш. р.), т. е. реакции кожи на гретый токсин, то она объясняется чувствительностью организма к термостабильным продуктам метаболизма дифтерийной палочки и веществам питательного бульона. Эта чувствительность аллергического характера. Как показал Зигль (Siegl), она слагается из двух компонентов-специфического и неспецифического по отношению к дифтерии. Наблюдения Целлера (Zoller) показали полную идентичность ложной реакции с внутри-кожной реакцией на анатоксин (0,2 анатоксина, разведенного в отношении 1: 100)-это так называемая реакция Целлера. В зависимости от результата реакций на токсин и на анатоксин Целлер делит всех людей на 4 группы (см. табл.). Процесс иммунизации против дифтерии Целлер представляет себе следующим образом: чувствительные к дифтерии лица (I группа с Характеристика группы Реакция | Реакция Целлера Шлка f 1 Чувствительные к II f длфтерчи III 1 Иммунные к двф- IV / терии + + + 1 Стадий +) аллергии положительной Ш. р.) при встрече с дифтерийной палочкой (б-нь или носительство) или при искусственной иммунизации сенсибилизируются по отношению к микробу и его продуктам. Кожа их дает реакцию аллергии; но т. к. при этом еще не выработалось достаточного количества антитоксина, то кожа реагирует и на активный токсин (II группа с ложной или комбинированной Ш. р.). В дальнейшем количество антитоксина в крови увеличивается настолько, что реакция на активный токсин делается отрицательной, но аллергия еще остается (III группа с извращенной Ш. р.); наконец последняя исчезает, и наступает прочный иммунитет, характерный для лиц IV группы (с отрицательной Ш. р.). Значение Ш. р. как иммуно-реакции определяется господствующими взглядами на природу иммунитета при дифтерии. По современным представлениям в основе последнего лежит наличие достаточного количества антитоксина в крови. Эти представления, как известно, определяют современную практику иммунизационной профилактики дифтерии (смеси токсин-антитоксин, анатоксин). С этой точки зрения Ш. р., удобно заменяющая громоздкое прямое определение антитоксин в крови по способу Ре-мера, может считаться идеальным способом выяснения состояния иммунитета, resp. чувствительности, человека к дифтерии. Вопрос о минимальном количестве антитоксина в крови, потребном для осуществления прочного иммунитета к дифтерии, является спорным; во всяком случае необходимо отметить сравнительную редкость заболевания дифтерией лиц, имеющих отрицательную Ш. р.; кроме того можно указать и на прямое экспериментальное подтверждение этого вопроса: Гетри, Маршаль и Мосс (Gu-tnrie, Marshall и Moss) заразили путем смазывания зева вирулентной культурой дифтерии восемь добровольцев, из к-рых четыре имели положительную Ш. р., а четыре отрицательную. В результате 4 лица первой группы проделали типичное заболевание, из 4 человек с отрицательной Ш. р. у 3 было отмечено временное носительство дифтерийной палочки без каких-либо признаков заболевания. Эпидемиологическому значению Ш. р. посвящено громадное количество работ. Из них явствует, что ГЛ. р. представляет надежный метод определения степени иммунной прослойки коллектива по отношению к дифтерии. Оказалось, что если распределить положительные Ш. р. по возрастам, то получается кривая (Zin-gher) возрастной чувствительности к дифтерии, довольно точно совпадающая с возрастным распределением заболеваемости дифтерией. Относительно высокий иммунитет детей раннего грудного возраста (до полгода) может быть объяснен пассивной передачей иммун-тел через молоко матери. Что касается падения чувствительности к дифтерии с возрастом (начиная с одного года), сопровождаемого накоплением антитоксина в крови, то одни авторы (Fried-berger и др.) считают это явление выражением «физиологического серогенеза», т. е. что накопление антитоксина идет в порядке физиологическом, сопровождая таким of. разом созревание человеческого организма, а другие авторы (Цингер, Дедли, Рамон и др.) считают, что люди накапливают антитоксин в крови в результате явной, а чаще «немой инфекции> дифтерией (см. рисунок). Эпидемиологическая ценность Ш. р. состоит и в том, что ею удобно пользоваться для отбора лиц, подлежащих (в случае положительного результата) активной иммунизации против дифтерии. Обычно она применяется у детей"-~-» $лиц, имеющих антитоксин в крови (по Грееру)
°--«> %лиц о положит, реакцией. Шика (по Парку и Цкнгеру) столбики - заболевагмость дифтерией Распределение по возрасту: лиц, имеющих антитоксин в крови (в %); лиц с положительной реакцией Шика (в %); заболеваемости дифтерией (°/ооо каждого возраста). в возрасте свыше 5 лет, имея в виду относительную редкость отрицательней Ш. р. в возрасте до 5 лет. Наконец III. р. применяется и в качестве объективного контроля эффективности предохранительных прививок против дифтерии. Эта эффективность доказывается переходом положительной (до прививки) Ш. р. в отрицательную после вакцинации (обычно через 6 недель после последней прививки). Техника производства Ш. р.: 1. Для того, чтобы приготовить необходимое разведение токсина в нужном объеме, исходят из Dim токсина. Допустим Dim токсина = 0,0032. Чтобы приготовить токсин, содержащий I / 4l) Dim в 0,2 объема, поступают так: берут lOODlm, в данном случае = 0,32, и добавляют физиологического раствора до 10,0, т. е. 9,68. Берут 1,0 этого разведения (т. е. 10 Dim) и прибавляют к 79,0 физиол. раствора. Тогда в 80,0 второго разведения имеется 10.Dim; в 1 см 3 следовательно-V» Dim, а в 0,2-Vio Dim. При каждом разведении необходимо брать свежую сухую пипетку, промывая ее не менее 10 раз. При этом необходима особенная четкость отмеривания и точность пипеток (половину приготовленного т. о. разведения токсина переливают в отдельную колбу и ставят в кипящую водяную баню на 10 мин.; т. о. получают гретый токсин для «контроля»). В виду того, что токсин, разведенный физиол. раствором, быстро теряет свою активность, удобнее для разведения брать т. и. боратно-буферный раствор (см. Дика реакция), в котором разведенный токсин сохраняет свою силу в течение несколь-I ких месяцев. 2. Впрыскивание производится строго внутрикожно, всего удобнее при помощи туберкулинового шприца с платиновой очень тонкой иглой (№ 18, 19). Игла должна иметь короткую бородку. Бородку при инъекции надо держать кнаружи. Введение токсина совершается медленно с известным напряжением, характерным для внутрикожного введения жидкости, и в результате на месте укола образуется хорошо отграниченный пузырек (Quaddel), имеющий вдавления на месте волосяных мешочков. 3. Впрыскивание активного токсина производят в кожу предплечья левой руки, гретый токсин вводится в кожу предплечья правой руки. При массовой постановке III. р. рекомендуется производить двум врачам одновременно - один вводит активный, другой гретый токсин. 4. Отсчет Ш. р. производится два раза: через 24 часа для учета ложных реакций и через 96 часов, когда истинная Ш. р. достигает кульминационного пункта. Лит.: Здродовский П., Современные проблемы специфической профилактикч дифтерии, Арх. биол. наук, т. XXXV, сер. А, вып. 2, 1934; Doull J., Factors Influencing selective distribution tn diphtheria, Journ. ol prevent, med., v. IV, 1930; Frost W., Infection, immunity and disease in epidemiology of diphtheria, Ibid., v. II, 1928; Meerseman, Fries et Renard, La diphte-rie chez les suiets a reaction de Schick negative, Compt. rend, de la soc. de biol., v. CXII, 1933; Park W., Toxin-antitoxin immunization against diphtheria, Journ. Amer. med. Ass., v. LXXIX, p. 1584, 1922; Rosl ing E., Die Schickreaktion und Ihre Bedeutung, Seuchen-bekamp-fung, B. VІI, 1930; Schick В., Die Diphtherietoxin- Hautreaktion des Menschen als Vorprobe des prophylak-tisohen Diphlherieheilseruminielition, M"inch. med. Wo-chenschr., 1913, № 47; S iegl J., Zur Frage der Entste-hung der Pseudoreaktion bei der Diphtherietoxinreaktion nach Schick, Arch. f. Kinderheilk., B. XCVІII, 1932; Z i n g he r A., The Schick test, Journ. of Amer. med. Ass., v. LXXVІII, 1922; Zoeller C, L"intradermo-reaction al"anatoxine diphterique ou anatoxf-reaction, Compt. rend. de la Soc. de biol., v. XCI, 1924. См. также лит. к ст. Скарлатина. Г. Орлов.
