Относящееся к группе больших коллагенозов, которое характеризуется диффузным поражением соединительной ткани и сосудов. Ранняя диагностика этой патологии является серьезной проблемой, так как СКВ может начинаться под «маской» других заболеваний. Поскольку СКВ является аутоиммунным заболеванием, то механизм его клинических проявлений, согласно современным представлениям, объясняется со следующих позиций:
Современные методы иммунологической лабораторной диагностики позволяют идентифицировать все компоненты патогенеза СКВ и тем самым с необыкновенной, практически 100% точностью, верифицировать диагноз заболевания. Вместе с тем наличие любых изменений в анализах позволяет их интерпретировать только с учетом индивидуальной клинической картины.
Следует отметить, что прежний способ диагностики СКВ по наличию в крови LE-клеток не выдержал испытание временем, показав крайне низкую чувствительность и специфичность, в связи с чем от него отказались. LE-клетки даже не включены в систему критериев СКВ.
Основными маркерами СКВ являются:
Показания для назначения анализа крови на маркеры системной красной волчанки
Как проходит процедура?
Забор крови осуществляется из локтевой вены натощак утром.
Подготовка к анализу
Волчаночный антикоагулянт (ВА, Lupus anticoagulants, LA) один из важных скрининговых и подтверждающих тестов диагностики АФС. ВА образуются в организме в результате развития аутоиммунных процессов после инфекционных воздействий и подавляют в крови реакцию превращения протромбина в тромбин. При выявлении этих антител в крови по удлинению коагуляционных тестов, их определяют как «волчаночный антикоагулянт».
Положительный результат:
Антинуклеарный фактор на клеточной линии НЕр-2 (АНФ HEp-2, титры; ANA IF, titers). Положительный результат АНФ отмечается более чем у 90% больных с СКВ и кожными формами этого заболевания, склеродермии , смешанном заболевании соединительной ткани , синдроме Шегрена . Результатом определения АНФ является титр, представляющий собой значение конечного разведения сыворотки, при котором сохраняется значимая флюоресценция ядра. Чем выше знаменатель дроби, тем больше разведение сыворотки, тем больше антител в сыворотке больного. Чувствительность этого теста для СКВ составляет 95%.
Высокие титры АНФ (1/640 и выше):
Низкие титры АНФ (до 1/160):
Антитела к нуклеосомам (NCA) являются одними из первых, которые формируются в организме в ходе развития СКВ. Титры NCA коррелируют с активностью заболевания. Специфичность определения данных аутоантител для диагностики СКВ более 95%.
Расшифровка результата анализа
Высокое содержание антител к нуклеосомам (положительно):
Присутствие антител класса IgG к двуспиральной ДНК (анти-дсДНК IgG; anti-dsDNA IgG) высокоспецифично для СКВ, в меньшей степени — при других диффузных болезнях соединительной ткани или лекарственно-индуцированной СКВ. Чувствительность теста для СКВ составляет 85%. Количественное определение анти-дсДНК IgG антител более всего подходит для мониторинга состояния, прогноза и контроля терапии у пациентов СКВ, так как коррелирует с ее активностью и тяжестью гломерулонефрита.
Расшифровка результат анализа
Повышение уровня:
Понижение уровня:
Антитела к кардиолипину IgG (aCL IgG) — один из видов аутоиммунных антифосфолипидных антител, включенных в патогенез антифосфолипидного синдрома. Их наличие в крови манифестируется пролонгированием фосфолипидзависимых тестов коагулограммы (протромбин, АЧТВ), что обозначают как «волчаночный антикоагулянт».
Расшифровка результата анализа
Антитела к кардиолипину IgM (aCL IgM) при их выявлении указывает на высокий риск развития СКВ; aCL IgM выявляются у 20-50% больных с системной красной волчанкой и 3-20% больных с другими системными ревматическими заболеваниями.
Интерпретация
Положительно (антитела обнаружены):
| Показатель | Норма | |
| Волчаночный антикоагулянт (ВА, Lupus anticoagulants, LA) | отрицатено | |
| Антинуклеарный фактор на клеточной линии НЕр-2 (АНФ HEp-2, титры; ANA IF, titers) | < 1:160 | |
| Антитела к нуклеосомам | < 20 отн. ед./мл | |
| Антитела класса IgG к двуспиральной ДНК | < 20 МЕ/мл (отрицательно) | |
| Антитела к кардиолипину IgG (aCL IgG) | отрицательно либо < 12 GPL-ед./мл | |
| Антитела к кардиолипину IgM (aCL IgM) | < 12 MPL-ед./мл | |
Антинуклеарные антитела (АНА,ANA, антиядерные антитела, антинуклеарный фактор-АНФ)- метод НИФ на линии клеток HEp-2 с определением тип свечения. - показатель аутоиммунных заболеваний соединительной ткани. АНА представляет собой группу аутоантител к белкам и другим компонентам (включая ДНК), находящимся в ядрах клеток. Основные показания к применению: исключение диагноза - системная красная волчанка (считается, что АНА появляются в 90% случаев СКВ, иными словами, отрицательный результат с вероятностью около 90% исключает диагноз СКВ), дифференциальная диагностика системных коллагенозов (системная красная волчанка, склеродермия, узелковый периартериит, дерматомиозит), хронический активный гепатит.
К настоящему времени описано более 200 разновидностей АНА, направленных против нуклеиновых кислот, гистонов, белков ядерной мембраны, компонентов сплайсосомы, рибонуклеоротеинов, белков ядрышек и центромер. При этом они повреждают соединительную ткань, что и способствовало внедрению определения антинуклеарного фактора в качестве теста на системные заболевания соединительной ткани. Под термином «антинуклеарный фактор» понимают тест для выявления антинуклеарных антител с помощью метода непрямой иммунофлюоресценции.
Одним из способов выявления антинуклеарного фактора в крови (антинуклеарных антител) является метод непрямой иммунофлюоресценции путем нанесения сыворотки пациента на клетки тканей перевиваемой линии человеческих клеток HEp-2 (клетки эпителиальной карциномы гортани человека линии Hep-2, содержащие различные ядерные антигены), используя меченый конъюгат с человеческими антителами. В качестве субстратов могут применяться и другие человеческие клеточные линии, однако благодаря хорошей морфологии и удобству культивирования именно линий Нер-2 стала общепризнанным субстратом непрямой иммунофлюоресценции. Метод обнаружения АНФ был разработан Tan в 1982, применившим в качестве субстрата человеческую перевиваемую эпителиоидную клеточную линию HEp-2. Это клеточная линия, полученная из аденокарциномы гортани человека, представляет собой крупные полиплоидные неороговевающие плоские эпителиоциты, образующие монослой на стекле. Сыворотку больного инкубируются с тканевым субстратом, при этом антинуклеарные антитела из сыворотки больного (если они присутствуют) связываются с соответствующими ядерным антигенами. Места связывания аутоантител детектируются с помощью античеловеческой антисыворотки, меченной флюоресцеином. Результаты реакции оцениваются микроскопией с помощью люминисцентного микроскопа и визуальной оценки характера свечения связавшихся антител. Среди преимуществ HEp-2 (при сравнении с криосрезами тканей животных) можно отметить высокую частоту деления клеток, позволяющую выявлять антитела к антигенам, экспрессирующимся только при делении клетки, и отсутствие клеточного матрикса ткани, затрудняющего визуализацию специфического свечения при сравнении с гистологическими срезами. При некоторых заболеваниях, например СКВ, системной склеродермии (системный склероз), некоторых инфекциях, иммунная система пациентов воспринимает ядра (белки ядер) клеток собственных тканей, как чужие, и продуцирует к ним антитела (антинуклеарные антитела - AHA). При этом они повреждают соединительную ткань, что и способствовало внедрению определения антинуклеарного фактора в качестве теста на системные заболевания соединительной ткани.
При интерпретации данных следует учитывать, что спектр AHA включает в себя большую группу аутоантител к ДНК, нуклеопротеидам, гистонам, ядерным рибонуклеопротеидам и другим компонентам ядра. Таким образом, тест направлен на обнаружение различных антител к компонентам ядра и цитоплазмы, которые впервые были обнаружены при СКВ. В дальнейшем диагностические критерии теста были расширены в связи с обнаружением данных антител и при других заболевания соединительной ткани.
В скрининговых тестах для определения суммарных АНА обычно используется набор следующих антигенов, являющихся основными маркерами аутоиммунных заболеваний соединительной ткани: SS-A (Ro), SS-B (La), BNP70, Sm, RNP/Sm, J01, центромере B.
Основные антигены, применяющиеся в современных наборах для выявления ядерных антител класса IgG
представлены следующим набором:
Часто АНА обнаруживаются при билиарном циррозе печени.
AHA обычно не проникают в живые клетки и поэтому безвредны. Но иногда они образуют комплексы антиген-антитело, которые вызывают повреждение ткани (как, например, при СКВ поражение почек). В связи с вовлечением в патологический процесс многих органов диагностическое значение определения AHA невелико и результаты анализа лишь частично подтверждают клинические данные.
Помимо ревматических заболеваний, АНА обнаруживаются и при хроническом активном гепатите до 50% случаев. Появление (низкие титры) возможно при воспалительных заболеваниях, онкологии и вирусных инфекциях.
| Заболевание и состояние | Частота выявления, % |
|
СКВ
|
95-100
|
|
Люпоидный гепатит (новое название - хронический аутоиммунный гепатит)
|
70 -80%
|
|
Синдром Фелти (Felty. 1924 г.) - ревматоидный артрит + спленомегалия + нейтропения + лейкопения + лимфоаденопатия.
|
95-100
|
|
Системная склеродермия
|
75-80
|
|
Лекарственный волчаночныи синдром (гидралазин, прокаинамид, изониазид)
|
Около 50
|
|
Синдром Шегрена (Аутоиммунное системное поражение соединительной ткани. Характеризуется вовлечением в патологический процесс желез внешней секреции, главным образом слюнных и слезных, и хроническим прогрессирующим течением).
|
40-75
|
|
Клинически здоровые родственники пациента с СКВ
|
Около 25
|
|
Дискоидная красная волчанка
|
15-50
|
|
Хронический ювенильный артрит, ревматоидный артрит
|
15-30
|
|
Узелковый периартериит
|
15-25
|
|
Дерматомиозит и полимиозит
|
10-30
|
|
Ревматизм
|
Около 5
|
|
Синдром Рейно
|
15-20
|
Существует ряд заболеваний, при которых защитная система принимает клетки собственного организма за чужеродные, после чего начинает ошибочно их атаковать. Большинство аутоиммунных патологий имеют хроническую форму и представляют серьезную угрозу для здоровья. Для того чтобы выявить данные недуги на самой ранней стадии их развития, врачи назначают анализ АНФ. Данная аббревиатура расшифровывается как «антинуклеарный фактор». В некоторых заключениях исследование помечается как АНА. Значение расшифровывается как «анализ на антинуклеарные антитела». АНФ - это клинически значимый показатель, помогающий врачу составить максимально эффективную схему лечения и не допустить развития осложнений.
Биологическим материалом для исследования является кровь. При проникновении в организм любого патогенного микроорганизма иммунная система начинает вырабатывать специфические антитела, задачей которых является уничтожение чужеродных антигенов. Суть метода и заключается в обнаружении и количественном определении этих веществ в жидкой соединительной ткани.
Врачи утверждают, что АНФ-анализ крови - это лабораторный имеющий высокую степень информативности. С его помощью возможно выявить любые аутоиммунные патологии даже на ранней стадии их развития.
Специфические антитела также нередко выявляются у людей, страдающих от тяжелой формы гепатита, онкологии и некоторых инфекционных заболеваний. Данные вещества могут быть обнаружены и у здоровых людей. Подобная ситуация требует комплексного подхода для выявления причины.
АНФ-анализ иногда подразумевает оценку количественного содержания иммуноглобулинов. Их наличие может свидетельствовать о развитии коллагенозов и заболеваний ревматического характера.
Важно знать, что АНФ-анализ крови - это исследование, которое назначается с целью подтверждения или исключения наличия аутоиммунных патологий, а также для оценки эффективности проведенного лечения.
Заподозрить недуг врач может по следующим симптомам:
Кроме того, АНФ-анализ назначается при подозрении на наличие ревматического заболевания. Исследование проводится после получения результатов лабораторной диагностики, в которых увеличены показатели СОЭ, ЦИК и С-реактивного белка.
АНФ-анализ крови позволяет выявить патологии аутоиммунного характера. Исследование информативно в отношении следующих заболеваний:
Это неполный список заболеваний. Важно, что анализ АНФ показывает развитие аутоиммунных патологий на самой ранней стадии их течения. Это позволяет врачу определиться с тактикой лечения, а в дальнейшем оценить его эффективность.
Забор биоматериала осуществляется в утренние часы. Сдавать кровь необходимо натощак. Последний прием пищи должен быть совершен минимум за 4 часа. При этом пить воду допустимо в любое время и в любых количествах. Под запретом употребление алкоголя.
За 1 день до исследования показан покой. Физические и психоэмоциональные нагрузки нередко приводят к ложному результату. За полчаса до сдачи крови запрещено курить.
Необходимо поставить в известность врача о принимаемых медикаментах во время назначения им анализа АНФ. Это обусловлено тем, что активные компоненты некоторых препаратов провоцируют выработку антител и также могут стать причиной лекарственной волчанки. Ложноотрицательные результаты нередко являются следствием приема глюкокортикостероидов.
Если пациенту были назначены физиопроцедуры или инструментальные обследования, их необходимо проводить только после сдачи крови.
Он осуществляется в утренние часы. Биологическим материалом является венозная кровь. Ее забор проводится согласно стандартному алгоритму. Как правило, кровь берется из вены, расположенной на локтевом сгибе.
После того как жидкая соединительная ткань будет получена, из нее выделят сыворотку. Именно она необходима для проведения анализа.
В настоящее время обнаружить антитела в биоматериале возможно несколькими способами:
Расшифровкой АНФ-анализа должен заниматься лечащий врач. При наличии положительных результатов исследований назначаются дополнительные тесты. Окончательный диагноз не ставится на основании заключения одного анализа.
Наилучшим результатом является тот, при котором антинуклеарные антитела отсутствуют. Однако стоит помнить о том, что они могут обнаружиться и у совершенно здоровых людей. В этом случае показано проведение повторного исследования.
Норма анализа АНФ - титр не более 1:160. При этом данный показатель актуален как для взрослых, так и для детей.
Во время расшифровки АНФ-анализа крови важно учитывать следующую информацию:
Анализ АНФ, осуществленный с помощью клеток НЕр-2, считается нормальным, если титр не выше 1:160. Результат более 1:640 свидетельствует об обострении ревматических патологий. В период ремиссии заболевания титр снижается до 1:320. При этом только врач сможет выявить тот факт, о чем говорит такой низкий показатель, основываясь на данных анамнеза и индивидуальных особенностях здоровья пациента.
Связываясь с антигенами, образуют иммунный комплекс. Последний, в свою очередь, является пусковым фактором развития воспалительного процесса в стенках сосудов. В результате у человека появляются первые тревожные симптомы системных заболеваний. Анализ же показывает высокие титры.
В этом случае патологию можно выявить, определив тип свечения. Интерпретация результатов:
Уменьшение уровня антинуклеарных антител имеет клинически важное значение исключительно при прогнозировании и мониторинге имеющихся и ранее выявленных системных заболеваний.
Показатель АНФ напрямую зависит от интенсивности патологического процесса. В связи с этим его уменьшение - это благоприятный признак, свидетельствующий о том, что лечение было проведено успешно, а болезнь перешла в стадию ремиссии.
Каждая патология аутоиммунного характера требует определенного терапевтического подхода. Цель проведения исследования крови на АНФ - выявить в жидкой соединительной ткани антитела и оценить характер их взаимодействия со специфическими антигенами. На основании результатов диагностики врач может предварительно поставить диагноз. Для его подтверждения необходимо проведение дополнительных исследований. И только после этого врачом составляется схема лечения. Выбор медикаментозных средств напрямую зависит от того, какая патология выявлена у человека.
Сдать анализ АНФ можно в независимой лаборатории, частной клинике или государственном медицинском учреждении. Важно знать о том, что не во всех бюджетных поликлиниках подобная услуга предоставляется. Относительно ее наличия необходимо уточнять в регистратуре.
Исследование является платным даже в государственных медицинских учреждениях. Стоимость анализа напрямую зависит от ценовой политики клиники, складывающейся из множества факторов. Минимальная цена составляет 1000 рублей, максимальная не превышает 1700 рублей. Кроме того, необходимо дополнительно оплатить забор крови. Стоимость данной услуги, как правило, не превышает 200 рублей.
Аббревиатура АНФ расшифровывается как антинуклеарный фактор. В норме он не должен присутствовать в крови здорового человека или же его концентрация должна быть менее 1:160. Анализ на АНФ назначается для того, чтобы выявить у пациента патологии аутоиммунного характера на самой ранней стадии их развития.
Суть метода: при проникновении в организм провоцирующих агентов защитной системой начинают вырабатываться антитела. Их задача - атаковать антигены и уничтожить их. Для выявления данной реакции у пациента осуществляется забор венозной крови с последующим отделением сыворотки. В последнюю добавляют специфические антигены и оценивают дальнейшие реакции.
Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.
Единицы измерения: титр.
Интерпретация результатов
Результатом определения АНФ является титр, представляющий собой значение конечного разведения сыворотки, при котором сохраняется значимая флюоресценция ядра. Чем выше знаменатель дроби, тем больше разведение сыворотки, тем больше антител в сыворотке больного. Высокие титры разведения сыворотки отражают высокую аффинность и концентрацию аутоантител.
Выявление высоких тиров (1/640 и выше) указывает на высокую вероятность системного ревматического заболевания или аутоиммунного заболевания печени и требует внимательного клинического, лабораторного и инструментального обследования. Отсутствие повышенных титров антинуклеарного фактора значительно снижает вероятность системных аутоиммунных заболеваний.
В низких титрах (до 1/160) антинуклеарный фактор может отмечаться у 1-2% здоровых лиц и родственников больных с системными заболеваниями. Частота положительных титров в популяции несколько увеличивается с возрастом. Низкие титры антинуклеарных антител могут встречаться при многих аутоиммунных, инфекционных и онкологических заболеваниях. Отсутствие высоких титров антинуклеарных антител значительно снижает вероятность системного ревматического процесса и может использоваться скорее для исключения, чем подтверждения диагноза.
Повышение титров АНФ в динамике указывает на обострение системного заболевания, так при СКВ титр коррелирует с тяжестью процесса и снижается при эффективной терапии.
Кроме титра сыворотки, при положительном результате анализа описывается тип свечения ядра. Он обусловлен широким спектром антител, которые находят свои мишени внутри клетки. Описано более 20 типов свечения, однако в клинической практике используется 8 из них:
Референсные значения: < 1:160
| Тип свечения | Мишени антител (примеры) | Заболевания |
| Гомогенный | Хроматин (дсДНК, гистоны) | СКВ, склеродермия |
|
Гранулярный (мелко- ; крупно-) | Нуклеопротеины (RNP, Sm, SS-A, SS-B) |
СКВ, смешанное заболевание соединительной ткани, дискоидная и подострая кожная красная волчанка, ревматоидный артрит, ювенильный ревматоидный артрит, синдром Шегрена |
| Ядрышковый | Антигены ядрышка (фибриллярин) | Диффузная склеродермия |
| Центромерный | Центромера в хромосоме (CENT-B) | Склеродермия |
| Цитоплазматический | Антигены цитоплазмы (тРНК-синтетазы, рибосомы, органеллы) | Аутоиммунные заболевание печени, системная красная волчанка, полимиозит |
| Цитоплазматический (митохондриальный) | Антигены митохондрий (антигены пируват-декарбоксилазного комплекса) | Первичный билиарный цирроз |
| Точки в ядре | Нуклеопротеины | Аутоиммунные заболевание печени |
Иногда могут быть описаны 2 типа свечения, при котором один в низких титрах маскирует другой. При выявлении положительного результата АНФ необходимо постараться установить антигенные мишени антинуклеарных антител, с помощью тестов выявления антител к двуспиральной ДНК (№126) и антител к нуклеосомам (№956), иммуноблота антинуклеарных антител (№827), иммуноблота антител при склеродермии (№826), иммуноблота антител при полимиозите (№ 939) и определения антител к кардиолипину (№№ 967- 969, 997).
Антинуклеарный фактор
Антинуклеарный фактор – лабораторный анализ, направленный на определение различных видов специфических иммуноглобулинов к структурам клеточного ядра. Показатель АНФ повышается при системных заболеваниях соединительной ткани. Тест выполняется с целью их диагностики, дифференциации, контроля лечения, выявления обострений. Назначается при клинических и лабораторных признаках системной красной волчанки, склеродермии, синдрома Шарпа, Шегрена, ревматоидного артрита, воспалительной миопатии. Исследованию методом РНИФ подвергается сыворотка венозной крови. Нормальный показатель – титр не выше 1:160. Сроки подготовки данных теста – 8 рабочих дней.
В основе ревматических болезней лежит аутоиммунная реакция против структур ядра клетки – комплексов из протеинов и нуклеиновых кислот. Антигены образуются при программированной гибели эпителиоцитов и лимфоцитов. Ультрафиолетовые лучи, инфекционные агенты, лекарства ускоряют разрушение клеток, замедляют удаление апоптозных телец, провоцируют развитие аутоиммунных процессов. Антитела к структурам ядра представлены множеством видов, при исследовании антинуклеарного фактора выделяется около восьми. Преимуществом теста является высокая специфичность – определяются антитела, которые невозможно очистить для ИФА . Однако часть иммунных комплексов экстрагируется в плазму при выполнении РНИФ, поэтому существует вероятность ложноотрицательного результата.
Исследование антинуклеарного фактора показано при системных патологиях соединительной ткани. Основанием для назначения теста служат:
Биоматериал для определения антинуклеарного фактора – венозная кровь. Процедура забора осуществляется утром. Правила подготовки следующие:
В лаборатории из крови выделяют сыворотку. Определение в ней антиядерных АТ выполняется методом РНИФ с применением клеточной культуры НЕр-2. Титр оценивается по наибольшему разведению биоматериала, при котором обнаруживается свечение ядерных структур, вид иммуноглобулинов – по характеру флуоресценции. Сроки выполнения анализа – 6-8 дней.
В норме результат исследования антинуклеарного фактора отрицательный. Титр не выше 1:160 для взрослых и детей. При интерпретации итогового значения учитываются замечания:
Антиядерные АТ не обладают цитотоксическими свойствами, но после их связывания с антигенами образуются иммунные комплексы, запускающие процессы воспаления в сосудистых стенках. Они проявляются поражениями кожи, почечных клубочков, оболочек суставов, плевры. Развивается симптоматика, характерная для системных патологий. По типу свечения с минимальным разведением сыворотки определяются возможные заболевания:
Снижение показателя имеет прогностическую ценность при мониторинге системных заболеваний соединительной ткани. Уровень ANA коррелирует с активностью патологических процессов, поэтому уменьшение их концентрации – признак ремиссии, успешности терапии.
Тест на антинуклеарный фактор позволяет выявить наличие антител к ядерным антигенам и определить их вид. Благодаря этому анализ широко применяется для дифференциальной диагностики ревматических болезней. За интерпретацией результата и назначением лечения необходимо обратиться к врачу – ревматологу , иммунологу, дерматовенерологу .
